轉自(zì)“中國(guó)體(tǐ)外(wài)診斷網 CAIV♠φ✘¶D”

PD-L1抗體(tǐ)試劑的(de)審評挑↕>戰

免疫治療自(zì)2013年(nián)被評為(wèi)“突破性©§  療法”以來(lái)，美(měi)國(guó)、歐≠∞α洲、日(rì)本等國(guó)家(jiā)已批準♥←了(le)多(duō)個(gè)用(yòng¶πΩ♥)于不(bù)同癌種的(de)PD-1/P¶∞D-L1免疫藥物(wù)，我國(guó)也¶Ω(yě)于近(jìn)期批準上(shàng)市(shì)了(l εe)PD-1免疫藥物(wù)。随著(zhe)PD-1/P✔≈D-L1免疫藥物(wù)的(de)廣泛使用(yòng)，如♣≤(rú)何應用(yòng)免疫标志(zhì)物(wù)選擇™‌↕合适的(de)治療人(rén)群成為(wèi)免疫治療面臨的(∑ $©de)主要(yào)挑戰之一(yī)。

多(duō)項大(dà)型臨床研究顯示，在腫瘤≥↕♠←患者中，PD-1/PD-L1抑制(zhì)劑治§→療的(de)獲益程度與腫瘤患者PD-L1表達存在相(xiàng)關性。通(t÷÷ōng)過免疫組織化(huà)學的(de)方法檢測腫瘤患者的(de)PD-β→​φL1表達是(shì)目前公認的(de)有(yǒu)效的(de)方法。對(≈↑<duì)腫瘤患者的(de)PD-L1表達水(shuǐ)平進行(xíng)檢≤§∏←測，可(kě)以鑒别出哪些(xiē)腫瘤患者适合使¥∏用(yòng)PD-1/PD-L1抑制(zhì)劑進行(xí ∑✘ng)治療。

目前世界各國(guó)針對(duì)PD-1/PD-L1抑制(zhì)劑Ω∞Ω開(kāi)發了(le)多(duō)個(gè)基于免疫組織化(huà)學↕>方法的(de)檢測試劑，用(yòng)于評估PD-L1的(de)表達情況"​>，包含不(bù)同的(de)抗體(tǐ)、克隆、平台、評分(fēn)系統和★↔'(hé)臨界值設定，分(fēn)别作(zuò)為(wèi)各自(zì)<∞&藥物(wù)的(de)伴随診斷試劑。但(dàn)4種PD-1/PD™✘-L1抑制(zhì)劑臨床研究中應用(yòng)的(≥>de)檢測抗體(tǐ)（克隆号分(fēn)别為(wèi>♥↑)28-8、22C3、SP142、SP26<↑3）均未在我國(guó)獲得(de)上(shàng)市(shì)批準。目δ♥前，克隆号為(wèi)SP263、SP142和‌β•↕(hé)22C3的(de)抗體(tǐ)試劑在我國(guó)已§≥λ進入注冊申請(qǐng)過程，其中部分(fēn)申報(bào)産品進入優✘λα$先審查程序。

PD-L1抗體(tǐ)試劑的(de)審評難點集中在臨床試驗部分(fēn∏α)。首先，PD-L1抗體(tǐ)試劑的(de)判讀(dú)方式✔γ與一(yī)般輔助診斷用(yòng)途的(de)免疫組織化(huà)學抗>®λ體(tǐ)試劑有(yǒu)所不(bù)同。PD-L1的(de)表達情況是(s>÷§σhì)通(tōng)過計(jì)算(suàn)←&任何染色強度下(xià)腫瘤細胞和(hé)/或免疫細胞染色的™ (de)百分(fēn)比予以評定。然而，不(b ₹€$ù)同克隆的(de)PD-L1表達判讀(dú)标準以及阈值×₹設定并不(bù)相(xiàng)同，陽性染色位置設定亦不(‌Ω×bù)相(xiàng)同，造成了(le)PD-1/PD-L1抑制(zhì)×<劑研究結果無法互相(xiàng)通(tōng)用(yòng)或橫向比&π±↓較。如(rú)何選擇一(yī)緻性研究中的(de)對(duì)比試劑及合理 •(lǐ)進行(xíng)平行(xíng)判讀(dú÷÷)結果的(de)比較，是(shì)審評過程中需要(yào)考慮的(de♠→™β)問(wèn)題。

另外(wài)，目前國(guó)內(nèi)多(du¥↓♥ō)家(jiā)單中心初步研究數(shù)據顯示，我國(guó)肺癌患$ββ者的(de)PD-L1表達與國(guó) ₹外(wài)研究稍有(yǒu)不(bù)同，不(bù)♦ε同病理(lǐ)類型癌種的(de)PD-L1表達情況與國(guó)外(¶​§wài)存在差異。因此，在伴随診斷臨床意義的(<✔≥de)驗證中，如(rú)何合理(lǐ)接受境外 ✔γ(wài)臨床試驗數(shù)據也(yě)是(s​↔§hì)審評過程中的(de)挑戰。

關于人(rén)類Brca1/2基因突變檢測試劑注冊審評概述

一(yī)、Brca1基因和(hé)Brca2基因概述≠×‍♣

Brca1基因和(hé)Brca2基因都(dōu)£≥是(shì)常染色體(tǐ)顯性遺傳的(de)腫瘤抑制(zhì)基因，參與D₩‍↑"NA的(de)損傷修複和(hé)轉錄調控。研究表明(mín$♠g)，Brca1/2基因突變的(de)腫瘤細胞對(duì)PARP抑制(zh¶ ≠™ì)劑的(de)敏感性顯著高(gāo)于正常細胞，通♣™≠Ω(tōng)過抑制(zhì)PARP-1的(de)活'¥λα性可(kě)使Brca1/2基因突變的(de)腫瘤細胞發生(shēng)合δε•成緻死。修飾酶PARP-1（Ⅰ型多(duō)聚ADP-核糖聚合酶₩≠÷，poly(ADP-ribose) polymerase 1）π≈σ在DNA損傷修複和(hé)細胞凋亡中發揮重要(yào)作(z₩↔‍♣uò)用(yòng)，Brca1基因和(hé)‍§ Brca2基因發生(shēng)突變的(∞≥de)腫瘤細胞往往依賴PARP-1完成對(duì​δ)DNA損傷的(de)修複，因此PARP抑制(zh §π∞ì)劑通(tōng)過抑制(zhì)PARP-1的(de)功能(↓✔néng)可(kě)靶向殺傷Brca1/2基因突變的($♦<de)腫瘤細胞。臨床研究表明(míng)，Brca1基因或Brca2基↕↔≈γ因突變的(de)卵巢癌和(hé)乳腺癌患者可(kě)以從(cóng)÷↑☆∑PARP抑制(zhì)劑奧拉帕尼和(hé)Rubraca等♣​‌®治療中獲益。

目前美(měi)國(guó)食品與藥物(wù)管€λ∏®理(lǐ)局（FDA）和(hé)歐洲藥品管理(lǐ)局（EMA）等≈β✘∑已批準PARP抑制(zhì)劑用(yòng)于治療Brca1基因或Brca2"δ基因突變的(de)卵巢癌患者。奧拉帕尼治療乳腺癌的(de)臨床→ε&Ⅲ期研究于2017年(nián)宣布成功結束，達到(dào)β≤臨床設計(jì)的(de)首要(yào)終點目标，結果顯示可(kě)顯著延§ α→長(cháng)患者無進展生(shēng)存 δ§期，2018年(nián)12月(yuè)美(měi)國(©∑guó)FDA批準奧拉帕尼用(yòng)于攜帶Brca突變陽性的(de) "∏'晚期卵巢癌患者一(yī)線含鉑化(huà)療完全或部分(fēn)緩解患者的(d±©₹e)維持治療。該藥已于2018年(nián)8月(yuè)在中國(g€>αγuó)批準上(shàng)市(shì)。

二、Brca1基因和(hé)Brca2基因檢測試劑§≤↑π及審評難點

美(měi)國(guó)FDA陸續批準了(le)Brca1/2突變基因α‌檢測産品上(shàng)市(shì)。該類産品其共同特點是(shì)由美(m₩±ěi)國(guó)FDA指定該類産品在單一§‌'§(yī)檢測地(dì)點進行(xíng)檢測。而目前國(÷⧀guó)內(nèi)部分(fēn)專家(jiā)并不(bù)完全認同該模式§ "，認為(wèi)國(guó)內(nèi)臨床機(jī)★₩₽€構的(de)檢測和(hé)判讀(dú)能(nén♣λ♦g)力不(bù)低(dī)于企業(yè)的(de)≤π檢測和(hé)判讀(dú)能(néng)力，且中美(měi)醫(yī)療環境及→₩該類産品實際臨床檢測應用(yòng)發展存在差異。部分(fēn)臨床機(j↓÷φī)構配備相(xiàng)關人(rén)員(yuán)，具有(yǒu)λ≠≠ 較強的(de)檢測和(hé)解讀(dú)能(néng≈ ≤×)力，但(dàn)因Brca檢測業(yè)務在中國(guó)↑←開(kāi)展較晚，隻少(shǎo)數(shù)醫(yī)院能(néng)夠™¥×↑滿足上(shàng)述條件(jiàn)。部分(fē¥¥n)臨床機(jī)構目前不(bù)具備相(xiàng)關檢測能δ‌↓γ(néng)力和(hé)/或解讀(dú)能(néng)→δ力，質量難以評價和(hé)控制(zhì)。

開(kāi)展基于NGS測序原理(lǐ)的(de)Brca檢測需要(yδ×"λào)配備NGS實驗室及相(xiàng)關試驗人(rén)員(yuán)及生(£÷​♥shēng)物(wù)信息解讀(dú)人(rén)員(yuán)等，目前≥≥™₩歐洲分(fēn)子(zǐ)基因診斷質量聯盟(E∏™™uropean Molecular Genetics Quali  ←ty Network,EMQN)和(hé)國(guó)家(jiā)衛生±₽(shēng)和(hé)計(jì)劃生(shēng)育委員(yuán)會(¶☆huì)病理(lǐ)質控評價中心(PQCC)會(huì₹φ$ )對(duì)Brca每年(nián)進行(xíng)室間(jiān)質評，國$φ♠€(guó)內(nèi)部分(fēn)檢驗機(​↔jī)構也(yě)進行(xíng)過Brca項目的(de)♠→π室間(jiān)質評。但(dàn)目前對(d✔∏£ uì)于NGS實驗室還(hái)沒有(yǒu)有(yΩ©ǒu)效的(de)體(tǐ)系規範和(hé)考核，對(duì)解讀(←¶ &dú)人(rén)員(yuán)資質的(de)認可(£¶kě)也(yě)缺乏有(yǒu)效手段。

國(guó)內(nèi)目前沒有(yǒu)公認的(d ✔≠←e)人(rén)類遺傳病數(shù)據庫，數(shù)據對(duì)比主♣≥®∞要(yào)依靠國(guó)外(wài)數(♥≤shù)據。如(rú)何讓申請(qǐng)人(r<↕φ÷én)的(de)軟件(jiàn)接入的(de)數(shù)據庫充分(f≤≤ēn)且合理(lǐ)，以及如(rú)果國↔§(guó)內(nèi)出現(xiàn)數(shù÷∞π)據庫，什(shén)麽樣的(de)數(shù)β✔←據庫是(shì)可(kě)接受的(de)等問(wèn)題，✘∞都(dōu)是(shì)需要(yào)進一(yī)步探索的(de≠★)問(wèn)題。

三、小(xiǎo)結

通(tōng)過前期調研和(hé)討(tǎ¥÷o)論，我部門(mén)認為(wèi)該類産品的(de)☆>¥♥檢測應用(yòng)機(jī)構能(néng)力非常重要(yà®σ‌≥o)、檢測結果解讀(dú)較為(wèi)複×β✘雜(zá)，以及目前中國(guó)人(rén)群遺傳信息數(₽•shù)據缺乏等問(wèn)題，需要(yào)在其申請(qǐn ∑​g)上(shàng)市(shì)時(shε•í)對(duì)應用(yòng)檢測地(d ♦ì)點、産品質量、結果解讀(dú)、産品監管€∏₹✘等方面加強考慮。 

考慮到(dào)該類産品有(yǒu)重要(yào)的(de)臨床意義'​，為(wèi)了(le)保障檢測質量和(h★÷é)結果解讀(dú)的(de)能(néng)力。在技(jì)≥'☆術(shù)審評過程中，我們将考慮結合産品将其應用​β÷'(yòng)範圍限制(zhì)在一(yī)定檢測範圍內(nèi)。如(rú)&☆γ申請(qǐng)人(rén)相(xiàng)關®±的(de)檢測中心及一(yī)定範圍內(nèi)的(de)$§ 臨床機(jī)構。

Brca檢測應用(yòng)中，Brca遺傳信息數(shù≤♠÷)據庫是(shì)結果判斷的(de)重要(y↓ ào)依據。理(lǐ)想的(de)遺傳性疾病數(shù)據庫應<$↕該做(zuò)到(dào)公開(kāi)、可(kě)←®‌♠溯源、不(bù)可(kě)篡改數(shù)據、符合倫理(lǐ) €"π要(yào)求、有(yǒu)專人(rén)♦§​或團隊負責數(shù)據的(de)更新和(hé)維護等≥φ₽γ。鼓勵國(guó)內(nèi)大(dà)的(de)遺傳數(shù)據庫♥σλλ按照(zhào)上(shàng)述原則進行(xíng•♥)建設，并逐步建立國(guó)內(nèi)中國(guó)δλ人(rén)群數(shù)據庫。

綜上(shàng)，我們将積極探索我國(guó)該類産品的(de)審評模λδ式和(hé)上(shàng)市(shì)相(x✘↔iàng)關問(wèn)題。

包蟲病臨床診斷及病原體(tǐ)相(xiàng)♦§★©關遊離(lí)DNA（cfDNA）簡介

一(yī)、包蟲病簡介

包蟲病又(yòu)名棘球蚴病，是(shì)一(y≤☆ī)種古老(lǎo)的(de)人(rén)畜共患性♥×寄生(shēng)蟲病，主要(yào)由人(rén)感染棘球縧蟲的(de)幼蟲™₹所緻。該疾病分(fēn)為(wèi)囊型包蟲病和(hé)泡型®÷包蟲病兩種，分(fēn)别由細粒棘球蚴和(hé)多(duō)房(fáng)∞↑棘球蚴感染引起。兩種縧蟲都(dōu)必須在哺乳類動物π•α÷(wù)體(tǐ)內(nèi)寄生(shēng)才能(§•↑néng)完成生(shēng)活史，細粒棘球縧蟲的(de​₹)終末宿主一(yī)般為(wèi)犬和(₽$∞™hé)狼；多(duō)房(fáng)棘球縧蟲的(de)終末↔ ☆宿主一(yī)般為(wèi)狐狸、犬和(hé)狼↓≤。

近(jìn)年(nián)來(lái)，包蟲病呈全球性分(fēn∏™≈)布，我國(guó)包蟲病主要(yào)流行(x σíng)于西(xī)北(běi)牧區(qū)和(hé)半農(nóng)半牧$π地(dì)區(qū)，其中以新疆、西(xī)藏、甯夏、®​↑'甘肅、青海(hǎi)、內(nèi)蒙古、四川7省最為(wèi)嚴重。♣♦≈根據文(wén)獻報(bào)道(dào)，我國(guó)西(xī)部人(§♥rén)群包蟲病的(de)感染率為(wèi)3.1%～ 31.5%，患 ♦病率為(wèi)0.5%～5.0%，其中青藏高(gāo)原部分(&✘↕™fēn)地(dì)區(qū)人(rén)群患病率為(wèi)5.0％～10₩ ≠↕.0％。據2010年(nián)原國(guó)家(jiā)衛生(shēnα​g)和(hé)計(jì)劃生(shēng)育委員(yuán)♦≥∏ε會(huì)“防治包蟲病行(xíng)動計(jì)劃(2010—2015∞'​)”，我國(guó)西(xī)部地(dì)區(qū£×)包蟲病平均患病率為(wèi)1.08％，受威脅人(rén)口約$↕☆為(wèi)6600萬，每年(nián)造成直接經濟損₽™γ‍失30億元。

二、包蟲病診斷依據

根據現(xiàn)行(xíng)包蟲病診斷标準，包蟲病的(↔αde)臨床診斷要(yào)綜合考慮：流行(xíng)病學史、÷♥ ↔臨床表現(xiàn)、影(yǐng)像學檢查、實驗室檢查<€€→及病原學檢查幾個(gè)方面。

1.流行(xíng)病學史

該部分(fēn)主要(yào)考慮患者是(shì)否有(yǒu)在流γ✔行(xíng)區(qū)的(de)居住、÷λΩ工(gōng)作(zuò)、旅遊或狩獵史，或與犬、牛、羊等家(jiΩλ‌ā)養動物(wù)或狐、狼等野生(shēng)動物(wù• ₽)及其皮毛的(de)接觸史；在非流行(xíng)區(qū)有( ✘≠£yǒu)從(cóng)事(shì)來(lái)自(zì)流行(xíng)區(qφ✘"≠ū)的(de)家(jiā)畜運輸、宰殺、畜産品及皮毛加工(gōng)等暴™∑露史。

2.臨床表現(xiàn)

患者主要(yào)的(de)臨床表現(xiàn)為(wèi)棘球§ 蚴的(de)囊占位所緻的(de)壓迫、刺激、囊破裂引起的(de)一(ε∑yī)系列症狀，囊性包蟲病可(kě)發病全身(shēn™₽±¶)多(duō)個(gè)器(qì)官，以肝‌φ、肺為(wèi)常見(jiàn)；泡型包蟲病原發病竈幾乎都(​≈dōu)位于肝髒。

3.影(yǐng)像學檢查

主要(yào)為(wèi)通(tōng)過B超掃描、X線檢查、計π ∏←(jì)算(suàn)機(jī)斷層掃描或磁共振檢查發現(xiàn™©∑♠)占位性病變。

4.實驗室檢查

通(tōng)過酶聯免疫吸附試驗、間(j™★iān)接紅(hóng)細胞吸附試驗、PVC膜快(kuài)速ELISA、免疫δ±印迹技(jì)術(shù)等方法對(duì)包蟲病相(xi₹←♥‌àng)關的(de)特異性抗體(tǐ)、循 ®環抗原、免疫複合物(wù)進行(xíng)檢測。

5.病原學檢查

在手術(shù)活檢材料、切除的(de)病竈或排出物(wù)中發 ∑♦ε現(xiàn)棘球蚴的(de)囊壁、子(zǐ)囊‍¥∏、原頭節或頭鈎。此為(wèi)包蟲病的(de)♣λ¥<确診方法。

三、相(xiàng)關檢測産品介紹

對(duì)來(lái)源于患者或疑似患者人(rén)體(tǐ)樣本中的(d ×✘πe)包蟲病感染相(xiàng)關生(shēng)物(wù)标志(zhì)物(w£↔♥ù)進行(xíng)檢測是(shì)輔助診斷包蟲病的(de)重要(yào↔γβ)手段。相(xiàng)關生(shēng)物(w∞☆ ✘ù)标志(zhì)物(wù)包括特異性抗體(tǐ)、®€循環抗原、免疫複合物(wù)、病原體(tǐ)核酸<≈α™等。我國(guó)已批準四個(gè)包蟲病抗體(tǐ)檢測試劑，産品信息見¥↓₽(jiàn)表1，已批準産品均采用(yòng)免疫學方δ&¶法對(duì)樣本中的(de)病原體(tǐ)抗體(tǐ)進行(xíng)檢$≤™≠測，免疫學檢測有(yǒu)其自(zì)身(shē∏₽n)的(de)局限性，一(yī)方面，由于細粒棘球蚴和(h‍<≤é)多(duō)房(fáng)棘球蚴兩種病∑∏$原體(tǐ)自(zì)身(shēn)抗原存在交叉的(de)特點♥φ♣Ω，導緻應用(yòng)抗體(tǐ)檢測來(lái)區$σ(qū)分(fēn)囊型/泡型效果欠佳；另一(yī)方面，抗體(★"<←tǐ)檢測無法區(qū)分(fēn)現(xiàn)症感染與既往感染。随著 γ÷(zhe)檢測技(jì)術(shù)的(de)進步，病原體(tǐ)核酸‍↓±€及其遊離(lí)DNA（cfDNA）檢測為(wèi)£"感染的(de)輔助診斷提供新的(de)思路(lù)。目前，國(guó)α∞際上(shàng)尚無包蟲病核酸檢測相(≠∞​¶xiàng)關的(de)産品，我國(guó)επ↕≥已有(yǒu)細粒棘球蚴和(hé)多(duō)房☆ (fáng)棘球蚴核酸檢測試劑盒（PCR-熒光(guāng)探針法）Ωφπ産品獲批進入國(guó)家(jiā)藥監局創新醫(yī)療器(qì)械特别審查•≤≥&程序，該産品臨床應用(yòng)的(de)安全有(yǒu)效性仍然在驗證過程中δσ← 。

表1 我國(guó)已批準的(de)包蟲¥>♠∑病檢測試劑

四、病原體(tǐ)相(xiàng)關遊離(lí)DNA（cfDNA）簡介

近(jìn)年(nián)來(lái)，随著♣✘®(zhe)對(duì)寄生(shēng)蟲血漿遊離(§‌lí)DNA（cfDNA）的(de)研究，cfDNA在寄Ωδ生(shēng)蟲病的(de)檢測中得(d‌<e)到(dào)了(le)快(kuài)速發展，目前已有(yǒu)應¶♥用(yòng)cfDNA檢測對(duì)'€α♦瘧原蟲、弓形蟲、利士曼原蟲、錐蟲、血吸蟲等α₽‍≠寄生(shēng)蟲感染進行(xíng)輔助診斷的(de)報(bào)道(d  →₽ào)。針對(duì)寄生(shēng)蟲感染後cfDNA的(deπ×₩‍)來(lái)源，可(kě)能(néng)是(shì♥δ>&)蟲體(tǐ)或蟲卵的(de)細胞或碎片在增生 ✘™(shēng)、成熟、脫落、腐爛、崩解等過程中主動分(fē∑₩$®n)泌或被動釋放(fàng)出內(nèi)部的(d&>£e)DNA進入宿主體(tǐ)液循環系統産生(shēng)；也(yě)有(Ω'yǒu)研究表明(míng)縧蟲主動分(fēn)泌的(d÷₩e)外(wài)泌體(tǐ)是(shì)寄生(∑π♥shēng)蟲感染後患者體(tǐ)內(nèi)出現(xiàn)蟲源DNA的(d¥φe)重要(yào)原因。基于上(shàng)述研究，檢測樣本中細粒棘✔‌球蚴和(hé)多(duō)房(fáng)β€"&棘球蚴兩種病原體(tǐ)遊離(lí)DNA為(wèi)∞Ω₩該疾病的(de)輔助診斷提供了(le)理(lǐ)♠γ✘♣論基礎。

五、檢測遊離(lí)DNA的(de)考量

寄生(shēng)蟲源cfDNA的(de)檢測在臨床應用(yòng)中存在一γ∑☆'(yī)定優勢，一(yī)方面，可(kě)根據特異性的(de)‌ε₽基因序列對(duì)兩種不(bù)同種類的(de)病原體(tǐ)進行(xí¶'ε∞ng)分(fēn)型，從(cóng)而達到(¥$©δdào)對(duì)疾病進行(xíng)分(fēn)型的(de)•∞&&目的(de)；另一(yī)方面，患者樣本中存在寄生✔©€(shēng)蟲DNA在一(yī)定程度上(shàng)可(kě)提示患者可$®π(kě)能(néng)感染相(xiàng)關病原體∑'✔(tǐ)。然而，作(zuò)為(wèi)一(∏'✘¶yī)個(gè)新的(de)标志(zhì)物(  ∑φwù)，能(néng)夠應用(yòng)✔γ于臨床，在現(xiàn)有(yǒu)的(de)理(lǐ)論基×&$礎上(shàng)，還(hái)應進一(yī)步研究。一(y÷ ∏÷ī)是(shì)，應進一(yī)步明(míng)确患者不≠✔δ(bù)同疾病進展階段血漿遊離(lí)D≠β←≠NA濃度的(de)變化(huà)，并以此為(®α↓φwèi)基礎，确定該标志(zhì)的(de)臨床預期用(yòng)途（÷ 如(rú)：疾病早篩、輔助診斷、鑒别診斷及治療監γ★測等）；二是(shì)，應依據标志(zhì)∞∏物(wù)拟定的(de)預期用(yòng)途，Ω$進一(yī)步對(duì)該标志(zhì)物(wù)進行(xíng₩γ₹σ)臨床驗證，臨床研究應考慮入組人(rén)群、對(duì)照(zhào)↑¶方法等，如(rú)該标志(zhì)用(yòn÷←g)于疾病的(de)鑒别診斷，則入組人(rén)群應為(wèi)包蟲病疑似✘♣α人(rén)群，其中不(bù)同大(dà)小‍ (xiǎo)占位性病變病例、不(bù)同病竈退變（♥→♣¥CE4、CE5）病例、不(bù)同基因型病例等均應入組，此外(wài)還(≠↑πhái)應考慮非包蟲病病例的(de)幹擾。用‌☆÷(yòng)于疾病鑒别診斷用(yòng)途的(de)臨床研究其對(duì)照($∞zhào)方法應為(wèi)疾病确診的(d↕±≤•e)标準即病原學檢查。

六、總結

我國(guó)包蟲病防控形勢嚴峻，包蟲病流行(xβ ₽íng)區(qū)多(duō)為(wèi)相(xiàng)對(♥₽duì)偏遠(yuǎn)、落後的(de)地(dπδ←↔ì)區(qū)，目前包蟲病的(de)診斷很(hěn)大(÷≥$dà)程度上(shàng)依賴于影(yǐng)像學和(hé)病原學，這(zhèγφπ)不(bù)僅對(duì)臨床醫(yī)生(shēng)專業(yè)₹"技(jì)術(shù)水(shuǐ)平要(yào)求較高(gε₽āo)，還(hái)存在一(yī)定程度的(d"★→e)誤診、漏診的(de)風(fēng)險。血漿遊離(lí)cfDNA•♠"ε檢測操作(zuò)較為(wèi)簡便，結果易于解讀(dúλ≠ )，如(rú)能(néng)按預期應用(yòng)"↑→γ于臨床，将對(duì)包蟲病的(de)診斷起到(dào)積極作(zu✘₹↔±ò)用(yòng)。

乙型肝炎病毒耐藥基因檢測概述

一(yī)、乙型肝炎病毒耐藥基因檢測的(de)臨床意義

WHO相(xiàng)關資料顯示，全球感染₩∑過乙型肝炎病毒（HBV）的(de)患者超過三分(f≈"γēn)之一(yī)，而慢(màn)性乙型肝炎患者約有(yǒu)2.4<±億，乙肝嚴重影(yǐng)響著(zhe)人(rén)類的(de)生(shēng‌♣↑)命健康。HBV是(shì)傳染性疾病乙型病ε"§π毒性肝炎的(de)主要(yào)病因，感染HBV可(kě)£< 引起肝硬化(huà)甚至肝細胞癌變。HBV×& 屬嗜肝DNA病毒科(kē)，為(wèi)雙鏈DNA病毒，容易發生(™  shēng)變異，從(cóng)而形成不(bù)同的(de)基因β$★≠型。目前已根據HBV核苷酸序列異質性≥8%将其分(fēn)成A-J β÷10種基因型。在我國(guó)北(běi)π←¶®方以C型為(wèi)主，南(nán)方以←™↓ B型為(wèi)主，新疆有(yǒu)出現(xiàn)D型。↕£↕&作(zuò)為(wèi)常規抗病毒治療的(de)'•核苷（酸）類似藥物(wù)，拉米夫定(LAM)和(hé)阿德福韋酯(≤♥>ADV)等能(néng)夠有(yǒu)效抑制(zhì)HBV的(de$δ)複制(zhì)，然而長(cháng)期使用(yò∑™€ng)會(huì)導緻耐藥的(de)發生(shēng)，使治療Ω'↔₩效果明(míng)顯下(xià)降。随著(zhe)分(fēn∑₹)子(zǐ)生(shēng)物(wù)學的(de)快↑≥πα(kuài)速發展，越來(lái)越多(d₹☆♦uō)的(de)分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物•"(wù)學技(jì)術(shù)用(yòng)于H‍₹£∏BV的(de)基因分(fēn)析，從(cóng)而為(wèi)乙肝患者的(d¥πσ§e)抗病毒治療提供科(kē)學的(de)依據。↕↓↓盡早檢測HBV變異，準确判斷拉米夫定和(hé)阿德福韋酯等治療後耐藥，指↑§導個(gè)性化(huà)用(yòng)藥≤>  ，對(duì)于提高(gāo)乙肝治療成功率具¥¶有(yǒu)很(hěn)重要(yào)的(de)價值。

二、乙型肝炎病毒耐藥機(jī)制(zhì)以及常見(jiàn)的(£αde)突變基因位點

HBV基因型耐藥是(shì)指乙肝病毒出現(xiàn)某種特定的(dλ±e)突變，這(zhè)些(xiē)特定的(de)γ♥突變點導緻HBV耐藥。其分(fēn)子(zǐ)機(jī)制(π↕‍€zhì)是(shì)：HBV是(shì)一(yī)種變異較高(∞☆ ♦gāo)的(de)病毒，在複制(zhì)過程必須經過RNA中間(jiā¶£n)體(tǐ)的(de)逆轉錄複制(zhì)步驟，但(dàn)RNA&↓>聚合酶和(hé)逆轉錄酶缺乏校(xiào)正功能(néng​♦)，因此在宿主免疫壓力和(hé)抗病毒藥物(wù)的(d↑¥ ♠e)選擇壓力下(xià)，其核酸在少(shǎo)數(shù)位點上(sh≥≈‌₽àng)發生(shēng)突變是(shì)一(yī)種常見&←φ™(jiàn)現(xiàn)象。

HBV對(duì)核苷（酸）類似物(wù)耐藥÷₩>±的(de)産生(shēng)與HBV聚合酶基因變異有(yǒu)關，​©☆'并且HBV聚合酶基因變異是(shì)多(duō)位點的(de)，以C區α✔₽(qū)YMDD（酪氨酸－蛋氨酸－天冬氨酸－天冬氨酸）基序的(de)變異最為€♦₹(wèi)重要(yào)。拉米夫定(LAσ✔M)的(de)主要(yào)耐藥位點位于C區(qū)（rtM204V/I），∞&204位點的(de)蛋氨酸被缬氨酸（V）或¥"異亮(liàng)氨酸（I）置換，即rtM♠≥204V/I。上(shàng)述突變直接導緻病毒對(duì)藥物≤ ≥✘(wù)的(de)敏感性降低(dī)，被稱為(wèi)原發耐藥≤✔λ突變。另外(wài)部分(fēn)突變不(↔ πbù)直接引起病毒對(duì)藥物(wù)敏↕ ∑¶感性的(de)下(xià)降，但(dàn)可(kě)以恢複•​>原發耐藥變異病毒受損的(de)複制(zhì)力，被稱為(wèi)補償β÷₽♠耐藥突變，主要(yào)有(yǒu)rtV173L、rtL180M(常與r↔πtM204V共同出現(xiàn))和(hé)rtL80I(常與rtM2™↓₹£04I共同出現(xiàn))。比如(rú)≈₽₹，HBV雙點突變株如(rú)rtM204V/rtL180M，其病毒複制(zhì♠$←)能(néng)力強于rtM204I的(de)單點突變株，可(kě)×₽">能(néng)與rtL180M（B區(qū)）的(✔βλ₩de)變異補償C區(qū)YMDD變異株的(de)複制β¥(zhì)缺陷有(yǒu)關。而另一(yī)種代表藥物(wù)€☆∑∏阿德福韋酯(ADV)，其耐藥變異位點則主要(y₽♦↕φào)集中于HBV聚合酶基因B區(qū)rtA181T和(hé)D•ε¶σ區(qū)rtN236T位點。

三、乙型肝炎病毒耐藥基因檢測方法

1.PCR産物(wù)直接測序：是(shì)将HBV基因組的(de)逆轉錄γγ酶區(qū)進行(xíng)擴增後直接進行(xíng)測序分(ε↔fēn)析的(de)方法。PCR産物(wù)直接測序法可(kě©₹α<)檢測已知(zhī)和(hé)可(kě)能(néng)→₹>的(de)未知(zhī)耐藥變異位點，是(s↑&'£hì)最常用(yòng)的(de)基因型耐藥檢測方法之一®≥(yī)。PCR産物(wù)直接測序的(∞✘de)方法一(yī)般作(zuò)為(wèi)基因型耐藥檢測的(de)€​←金(jīn)标準。該方法的(de)缺點是(shì)靈敏π≤性較差，隻有(yǒu)當變異株超過HBV準種池的★$§→(de)20%時(shí)才能(néng)被發現(xi¶λεàn)。

2.聚合酶鏈反應-限制(zhì)性片段長(c ↔háng)度多(duō)态性(PCR-RFLP)：該方©↓法具有(yǒu)較強的(de)靈敏性，可(k±≥≠ě)檢測數(shù)量占HBV準種池5%的(de)耐藥變異株。但(dàn)是"‍&(shì)PCR-RFLP隻能(néng$ ₽ )檢測已知(zhī)、單一(yī)位點的(de‍∑)變異，對(duì)于少(shǎo)數(shù)耐藥變異位點監測不(φ×ελbù)失為(wèi)一(yī)種簡便、快(kuài)速且廉價的('∏de)方法。但(dàn)随著(zhe)多(duō ¶)種核苷（酸）類似物(wù)的(de)相(xiàng)$£σ繼問(wèn)世和(hé)HBV耐藥變異位點的(€¥de)不(bù)斷出現(xiàn)，該方法将<λ★σ難以勝任多(duō)位點變異的(de)檢$Ω≤測。

3.反向雜(zá)交法：基于該技(jì)術(sh♥εα​ù)的(de)INNO-LiPA方法在國(guó)外↕ελ∑(wài)已獲準應用(yòng)于臨床檢測，目ε☆π 前INNO-LiPA HBV DR v3₩∑↕ 可(kě)檢測包括拉米夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、恩替卡♦δ₽'韋(ETV)與阿德福韋酯(ADV)常見(j£↔ •iàn)耐藥位點。該法可(kě)檢測變異株占HBV準種池5% ~ 10%的(←™♦de)樣品，故敏感性較好(hǎo)，但(dàn)其同樣隻能(néng↓£♦)檢測已知(zhī)位點變異。

4.實時(shí)熒光(guāng)PCR：該方法操作(zuò)"'簡便，可(kě)檢測變異發生(shēng)率低(dī)于10%的(π&de)耐藥變異。僅能(néng)檢測已知(zhī)位點。

5.基因芯片：亦稱DNA芯片、DNA微(wēi)陣列，可(kě)檢‌&測已知(zhī)變異位點。

6.限制(zhì)性片段質譜多(duō)态性技(jì)術(s★←Ω₽hù)：該技(jì)術(shù)是(shì)将PCR-RFLP技(jì)術↕φ∏ (shù)與基質輔助激光(guāng)解吸電δ>(diàn)離(lí)飛(fēi)行(xíng)時(shí)間(jiān)質α$譜技(jì)術(shù)結合，靈敏度高(gāo)，能(£♦₩φnéng)夠發現(xiàn)數(shù)量不(bù)足HBV準↕≤✘種池1%的(de)變異株，但(dàn)其±≠φ同樣僅能(néng)檢測已知(zhī)位點變異，且價格昂≤∑貴，很(hěn)難在臨床推廣應用(yòng)。

四、目前已上(shàng)市(shì)産品介紹

我國(guó)已批準上(shàng)市(shì)的(d≈≈e)乙型肝炎病毒耐藥基因檢測試劑盒較多(duō)采用(yòng)熒光(guān​≠δαg)PCR法，主要(yào)為(wèi)國(guó)産産品，針€π∞☆對(duì)的(de)基因突變位點主要(yào)Ω 是(shì)204位點的(de)YMDD→YIDD♣≥（550ATG→ATT及550ATG→ATC）與YMDD→YVD∑☆→ΩD（550ATG→GTG）。還(hái)有(yǒu)較少(shǎo)産品δ↕能(néng)夠檢測發生(shēng)在180位點（≈✘rtL180M）的(de)基因突變。

五、小(xiǎo)結

由于肝細胞中的(de)共價環狀閉合DNA持續存在，使得(ε•de)乙肝患者需要(yào)長(cháng)期用(yòng©↕‍≤)藥治療。抗HBV核苷（酸）類藥物(wù)主要(yào)有(yǒu)拉米α$±夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、恩替卡韋(♣✘ETV)、阿德福韋酯(ADV)和(hé)富馬酸替諾€✔福韋酯(TDF)，其中前4種已在我國(guó)上(shàng)市(shì)。÷♠↑×長(cháng)期使用(yòng)核苷（酸）類似藥物(w$•"ù)不(bù)可(kě)避免地(dì)導緻耐藥基因突變，最終病毒恢複複制₩ε(zhì)能(néng)力，病情反彈。盡早∏✘↑®進行(xíng)乙肝病毒耐藥基因突變的(±±de)檢測，可(kě)以及時(shí)發現(xià✔∞n)病毒的(de)耐藥情況，指導醫(yī→'$)生(shēng)合理(lǐ)用(yòng)藥。随著(zhe)生(shēn♥♠g)物(wù)檢測技(jì)術(shù)的(de)發展，越✔©來(lái)越多(duō)的(de)突變位點被發現(xiàn↓≠)，為(wèi)此類産品的(de)技(jì)術(shù≠✔•β)審評帶來(lái)挑戰。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑與适用(yòng)儀器(qì)的(d★∑>≈e)技(jì)術(shù)審評情況介紹

一(yī)、背景介紹

《體(tǐ)外(wài)診斷試劑注冊管理(lǐ)辦法》規定,‌→×ε對(duì)于已獲批的(de)試劑增加适用(yòng)儀器(qì)情≈©δ況，注冊人(rén)可(kě)以采取申請(qε&÷ǐng)體(tǐ)外(wài)診斷試劑産♣✘£₩品許可(kě)事(shì)項變更的(de)形式進行(xíng)注冊φ$₹∞申報(bào)。區(qū)别于注冊申請(qǐng)，對(duì)于上(shàn♠×"☆g)述适用(yòng)于變更的(de)情況，注冊人( ↕rén)可(kě)以在不(bù)改變産品的(de→ ♦ε)設計(jì)以及技(jì)術(shù)原理(lǐ)的(↑☆δde)情況下(xià)，進行(xíng)設計(jì)變更​∞≈的(de)驗證或确認，更加靈活地(dì)進行(xíng)産品的(de)研發和 ≠(hé)生(shēng)産。

二、我國(guó)的(de)技(jì)術(s ∑λhù)審評情況及發展趨勢

随著(zhe)已獲批體(tǐ)外(wài)診斷試劑增γ₽加适用(yòng)儀器(qì)的(de)現(xiàn)象層出不(bù)€∏窮, 本著(zhe)科(kē)學審評的(de)原™₽則，參考國(guó)際先進監管經驗，我們也(yě)在工(gōng)作(zu ↕×ò)過程中探索新的(de)審評方式。具體(tǐ)的(de)實施路(lù¶↔✘)徑是(shì)由注冊人(rén)具體(tǐ)變更情形，從(c &óng)技(jì)術(shù)分(fēn)析和(hé)風(fēng)險'€₽↔管理(lǐ)兩個(gè)角度分(fēn)析并說©≤✘(shuō)明(míng)變化(huà)部分(fēn)對(d  ↕‌uì)産品安全性、有(yǒu)效性可(kě)能(γ$'≥néng)産生(shēng)的(de)影(yǐng)響。₩>↑≠根據上(shàng)述分(fēn)析和(hé)考量，自(γ λzì)行(xíng)選擇驗證或者确認變化(huà)部分(f≈★φēn)對(duì)産品安全性、有(yǒu)效性影(yǐn‍$g)響的(de)研究方法，包括分(fēn)析性能(néng)以及臨床♠σ$♠性能(néng)研究部分(fēn)，并制(zhì)定研究方法的(de)選擇依據€ ≠以及研究結果的(de)驗收标準。在此基礎上(shàng)制(zhì₹↑₽&)定研究方案，開(kāi)展對(duì)試劑盒和(hé)新增适用™↔<(yòng)儀器(qì)組合的(de)研究，詳•δ細記錄研究過程和(hé)結果以及得(de)出結論。另外(wài)，技(₩₩jì)術(shù)審評鼓勵注冊人(rén)盡可(kě)>επ能(néng)系統全面的(de)分(fēn)析和(hé)論證各類∏γ↕≈證據用(yòng)于支持增加适用(yòng)儀器(qì)的(de)科(k≥γē)學合理(lǐ)性。

注冊人(rén)可(kě)以通(tōng)過基于産品風(fēng)險的✔≈(de)評估，相(xiàng)應地(dì)進行(xíng)設計(jì)變↑§↑α更的(de)驗證與确認，分(fēn)析并評價新增加的(de)适用↓∞§(yòng)儀器(qì)對(duì)産品說(shuō)明(míng)書(☆φshū)聲稱的(de)分(fēn)析性能(néng)和(hé)臨床性能(nén★∏&g)的(de)影(yǐng)響。其中分(fēn)析性能(✘✘↑néng)包括對(duì)于試劑盒的(de)性能(néng)以及試劑盒和→∑"♣(hé)儀器(qì)組合性能(néng)的(de)評估驗證，前者例如(★∑rú)準确度、檢測限、精密度、線性或溯源性等，後者例如(rú★™©♦)攜帶或交叉污染、機(jī)載試劑和(hé)定标液穩•≥α↓定性或鈎狀效應等。同時(shí)應研究确認對(dλ÷✔÷uì)于臨床性能(néng)的(de)影(yǐng)響，例如(rú)是(s₹♠hì)否改變預期适用(yòng)人(rén)群的(de)參考區(qū)πΩ<間(jiān)或者陽性判斷值。另外(wài∏₩≠)還(hái)包括對(duì)臨床适應症的(de)‌'γ影(yǐng)響，例如(rú)在定性、半定量和(hé)定量結果判讀(d&®≤ú)更改，樣本類型的(de)更改或者增加高(gāo)靈敏度性能(né☆ →ng)的(de)情況下(xià)評價診斷靈敏度和(hé)特異性、陰陽性符合率←©‌×和(hé)總符合率等關鍵臨床參數(shù)。

根據上(shàng)述對(duì)于試劑盒和(®₹€hé)儀器(qì)組合進行(xíng)評估的(d €∏§e)驗證或确認研究，在結果顯示變更對(duì)産✘₩α品的(de)安全有(yǒu)效性不(bù)造成顯著影(yǐng)響，♥Ω并且不(bù)引發新的(de)風(fēng)險或者顯著改變現(xiàn)有( ₽∏→yǒu)風(fēng)險的(de)情況下(xià$♦)，注冊人(rén)即可(kě)以産品許可(kě)事(sh<×ì)項變更的(de)形式進行(xíng)注冊申♥¥× 報(bào)。

這(zhè)裡(lǐ)值得(de)注意的(de)是(shì)，在影(yǐn® g)響醫(yī)療決策制(zhì)定，也(yě)就(jiù)是(shβ≤'Ωì)顯著改變臨床性能(néng)的(de←✘)情況下(xià)，基于對(duì)産品臨床使用(yαπαòng)過程中潛在風(fēng)險的(d☆€©"e)考慮，建議(yì)注冊人(rén)将變更後ββγ₩的(de)試劑盒按照(zhào)新産品進行(xíng)注冊申報(π'↔™bào)。

三、其他(tā)國(guó)家(jiā)的(de)監管情況

對(duì)于類似的(de)情況，美(měi)國(guó)FDA于20← ™03年(nián)發布了(le)儀器(qì)替代家(jiā₽∑Ω$)族政策,并于2017年(nián)12月(yuèγ  )進行(xíng)了(le)更新。适用(yòng)範圍是(shì)已獲批的(d&§≤♠e)體(tǐ)外(wài)診斷試劑産品增¥÷£←加适用(yòng)儀器(qì)的(de)情況，前提是(shì)适用(yò↓ ≠☆ng)儀器(qì)已上(shàng)市(shì)或者與已獲批的(de)設備屬 ↕ 于同一(yī)個(gè)儀器(qì)家(jiā)族。這(zhèλ€)裡(lǐ)的(de)儀器(qì)家(jiā)族是(shì)指具有(yǒu÷Ω★)相(xiàng)同的(de)結構、設計(jì)、電(di®π®àn)氣安全和(hé)電(diàn)磁兼容φ≈π性能(néng)以及功能(néng)（如(rú)檢測方法、信号範圍和(h駶←)強度以及反應條件(jiàn)）的(de)設備系列；試劑和(hé)儀"λ器(qì)可(kě)以是(shì)相(xiàng)同或者不(bùγ♠​↓)同廠(chǎng)家(jiā)生(shēng)産的(dγ←§₩e)産品。注冊人(rén)應當根據檢測試劑盒的(de)質量體(tǐ)系要(×® yào)求評估試劑盒和(hé)新增适用(yòng)儀器(qì)組合的§₩∞©(de)性能(néng)，以确保申報(bλ∞×ào)的(de)檢測系統具有(yǒu)可(k←↔ě)接受的(de)性能(néng)。此外(wài)， ©δ↓試劑盒的(de)注冊人(rén)負責确保經調整或更改的(de)檢測系統能↕ (néng)夠持續滿足設計(jì)驗收标準。

對(duì)于試劑盒和(hé)新增适用(yòng₽&>)儀器(qì)組合的(de)性能(néng)研究,也(yě)就(j₩<iù)是(shì)将已獲批的(de)檢測系統的(de)₩'ββ性能(néng)轉移到(dào)新的(de)檢測系統後的(d®♣γe)評價路(lù)徑,美(měi)國(guó)FDA也(yě)≠"發布了(le)相(xiàng)關的(de)技(j£¥∞ì)術(shù)指南(nán)性文(wén)件(jiàn),并建議(yì)× ★Ω将研究結果納入PMA（上(shàng)市(shì)前批準）補充文(λ≈wén)件(jiàn)或新的(de)510（k）（上(shàng)市(λ∑shì)前通(tōng)告）文(wén)件(jiàn‍§₹)。包括定性檢測和(hé)定量檢測産品的₹"(de)轉移研究，其中定性檢測應評估産品的(de)診斷靈敏度、精密度© Ω以及使用(yòng)臨床樣本進行(xíng)比較研究等↓$αφ；定量檢測應評估産品的(de)分(fēn)析靈÷ ¶Ω敏度、精密度、線性範圍以及使用(yòng↕← )臨床樣本進行(xíng)方法學比對(duì)研究等。

根據上(shàng)述對(duì)于試劑盒和(hé)儀器(qì)組合進•↑☆行(xíng)評估的(de)驗證或确認研究，在結‌₽≈↑果顯示變更對(duì)産品的(de)安全有(yǒu)效性不(bù)造σ↓σ↔成顯著影(yǐng)響，并且不(bù)引發新的(de)風(fēng)險或者顯著×¥♠₩改變現(xiàn)有(yǒu)風(fēng)險的(de)情況下('♥≥♦xià)，注冊人(rén)即可(kě)考慮将檢測試劑盒應用(yòn×≥λ$g)于儀器(qì)家(jiā)族的(de)新成員(yuán)，并按照(γ✔₩¥zhào)質量管理(lǐ)體(tǐ)系的(de)要(yà↔>γo)求進行(xíng)相(xiàng)應的(de)文(wé  σn)件(jiàn)記錄或者提交PMA（上(shàng)市(shì)前γ$σ>批準）補充文(wén)件(jiàn)申請(qǐng)。

如(rú)果發生(shēng)下(xià)屬情形之一(yī)，美(​×$γměi)國(guó)FDA則要(yào)求注冊人(rén)提交新的(de ☆)510（k）或者PMA申請(qǐng)。第一(yī)種情況™☆®÷是(shì)體(tǐ)外(wài)診斷試劑的≤γ← (de)技(jì)術(shù)原理(lǐ)發生(shēng)改€δΩ變,包括反應原理(lǐ)（如(rú)雙抗原夾心法、雜(zá)交捕獲法），檢測模π≠≈γ式（如(rú)化(huà)學發光(guāng&™)法、比濁法），測量方法（如(rú)終點/速率、定性/定量），信号處理(l↕✔ǐ)方法，數(shù)據獲取和(hé)解讀(dú)方式，分(fēn)析前處∏φ€理(lǐ)步驟等。第二種情況是(shì)主要←‍→£(yào)原材料或關鍵反應成分(fēn)發生(sh♠÷ēng)更換,包括抗原-抗體(tǐ)、酶-底物(w™∞✔ù)、結合物(wù)、信号标記物(wù)、固相(xiàng)載體(tǐ)₩×&、引物(wù)-探針、目标物(wù)分(fē✔©€ n)離(lí)（如(rú)核酸提取）組分(fēn)等。

全面了(le)解艾滋病病毒檢測試劑

相(xiàng)關背景

2019年(nián)12月(yuè)1日(rì)是(shì)第32♦λ♦↓個(gè)“世界艾滋病日(rì)”，我國(guó)宣傳活動的(de)主題是(sו®hì)“社區(qū)動員(yuán)同防艾，健 ∏β康中國(guó)我行(xíng)動”。目前，我國(guó)∞π>₽艾滋病防控任務依然艱巨。

艾滋病的(de)診斷原則是(shì)以實驗室 ™&≈檢測為(wèi)依據，結合臨床表現(xiàn)并參考流行(xíng)病學資料≤÷±綜合進行(xíng)。本文(wén)對(duì)‌Ω§✘艾滋病病毒檢測試劑的(de)主要(yào)種類及各自(zì)的(de)用(y& €òng)途特點進行(xíng)介紹，幫您全面了(le)解艾滋病病毒檢測試ε‌₹Ω劑和(hé)檢測方法。

艾滋病，即獲得(de)性免疫缺陷綜合征（acquirφ$ed immunodef i ci ency syndr o♣ε≥♥me，AIDS)，是(shì)由人(rén)類免疫缺陷病毒（human iλ∏γ mmunodef i c i encyλ±↑→ vi r us，HI V）也(yě)就(jiù)是(shì)艾∏₽♠λ滋病病毒感染引起的(de)，以人(rén¥α™)體(tǐ)CD4+T淋巴細胞減少(shǎ ±∏★o)為(wèi)特征的(de)進行(xíng)性免✘££疫功能(néng)缺陷，疾病後期可(kě)繼發各種機(jī)會(huì)性感≈±δ染、惡性腫瘤和(hé)中樞神經系統病變等，ε≈♠ 病死率較高(gāo)。

目前，艾滋病是(shì)威脅我國(guó)公衆健康的(de)重要( ✘yào)公共衛生(shēng)問(wèn)題。據中國(guó)♠​疾病預防控制(zhì)中心、聯合國(guó)艾δ±滋病規劃署、世界衛生(shēng)組織聯合評估，我國(guó)新發感染者每$₽©年(nián)在8萬例左右，截至2018年(nián)底，我δ​國(guó)估計(jì)存活艾滋病感染者約125萬&★≤>，全人(rén)群感染率約9人(rén)/萬人(rén)。

HIV檢測試劑根據檢測目标物(wù)的(de)不(bù)同大(dà)緻分 •✔(fēn)為(wèi)：抗體(tǐ)檢測試$¥&劑、抗原檢測試劑、核酸檢測試劑和(hé)HIV基因型耐藥檢測試劑。♣®•通(tōng)常人(rén)們也(yě)會(huì)根據檢測試劑的"∑£ε(de)使用(yòng)特點、用(yòng)途、性♦♠÷∏能(néng)等，将其進行(xíng)歸類，如(rú) ♦HIV抗體(tǐ)快(kuài)速檢測試劑♦₩、HIV自(zì)測試劑、HIV抗體(tǐ)篩查試劑、HIV抗體∑∑(tǐ)診斷試劑、HIV抗體(tǐ)确證試劑等。檢測的(de)樣本類型♦''σ包括血液、尿液、口腔黏膜滲出液等。

一(yī)、HIV檢測試劑分(fēn)類：

1.發光(guāng)類檢測試劑

從(cóng)HIV感染人(rén)體(tǐ φ)到(dào)感染者血清中的(de)HIV抗體(tǐ)、抗原或核酸等感染标志•←✘ (zhì)物(wù)能(néng)被檢測出之前的≤¶•(de)時(shí)期，稱為(wèi)艾滋病↑€的(de)窗(chuāng)口期。此階段的(de)感染者具有(yǒu)傳染性，∑∏ ≈但(dàn)無法被檢測手段識别。随著(zhe)檢測手段的(de)叠代更新ε•←，艾滋病窗(chuāng)口期被一(yī)再縮↔±短(duǎn)。目前市(shì)場(chǎng)上"§™¥(shàng)的(de)主流艾滋病輔助診斷試劑為(wèi)第三代發光(gαΩ€¶uāng)類檢測試劑和(hé)第四代發光(guāσ♥> ng)類檢測試劑。第三代試劑檢測的(de)是(shì×≥γ♠)HIV-IgG和(hé)HIV-IgM抗體(tǐ)¶₩，窗(chuāng)口期3周左右；第四代試劑同時(shí>♣)檢測HIV抗體(tǐ)和(hé)p24抗原，窗(chuāng)口期✘£2周左右。

2.抗體(tǐ)快(kuài)速檢測試劑

目前已有(yǒu)多(duō)家(jiā)生(shēng)産§✘✔β商生(shēng)産的(de)快(kuài)速檢測試劑獲批上(shàng)市∑σ♣(shì)。此類試劑采用(yòng)膠體(tǐ♥♥φ)金(jīn)等免疫層析技(jì)術(shù)原理(lǐ)，檢測受試者血液、口'®π♦腔黏膜滲出液等樣本中的(de)HIV抗體(tǐ₹₽σ)。快(kuài)速檢測試劑一(yī)般隻需20分(f¶π×ēn)鐘(zhōng)即可(kě)獲得(de)結果。然而，快(kuài)速檢↔€測并不(bù)等同于早期診斷，并不(bù)能(néng)更早地(d↔<<ì)發現(xiàn)HIV感染。相(xiàng)反，基于該檢測方法的(de)局¥× 限性，當采用(yòng)非血液樣本進行(xíng)檢測時(shí)，♥✘應謹慎可(kě)能(néng)出現(xiàn‌♠)的(de)假陰性及假陽性結果。

3.自(zì)測試劑

擴大(dà)檢測（盡可(kě)能(néng)多(duō)地(dì)發現(≈×★≤xiàn)AIDS患者/HIV感染者）是(shì)我國(guó)預防控制(z<≤​hì)艾滋病的(de)核心策略。由于此疾病的(de)隐↑§匿性，及社會(huì)歧視(shì)、恥辱感等的(de)"'存在，高(gāo)危人(rén)群獲得(de)上(shàng)述醫(yīσ♣¶)學專業(yè)實驗室檢測的(de)覆蓋率仍不(bù)足。

今年(nián)7月(yuè)，我國(guó)首次批準了(le)可(k≥>↓ě)用(yòng)于消費(fèi)者自(zì)'¶≈♣測用(yòng)途的(de)HIV尿液抗體®≈(tǐ)檢測試劑。與上(shàng)述其他$♠(tā)檢測試劑不(bù)同，自(zì)測試劑在試劑性能(néng)滿足要(yε¥δào)求的(de)基礎上(shàng)，其産品設計(jì)更易操作( Ωzuò)，說(shuō)明(míng)書(shū)♦ε編寫更為(wèi)通(tōng)俗，适合無專業(y觙₹₹)背景的(de)人(rén)使用(yòng)。此類試劑‍€§在上(shàng)市(shì)前臨床試驗研究¥Ω中，對(duì)目标用(yòng)戶在醫(yī)院及家(jiā)中等可(kěγ‌≤)能(néng)應用(yòng)的(de¥♦)場(chǎng)景進行(xíng)自(z€∑☆§ì)檢試驗，并進行(xíng)了(le)消費(fèi)者對(duì)說≤•(shuō)明(míng)書(shū)、标簽等關鍵信息的(de)調查♣₹↕問(wèn)卷試驗，确認了(le)無專業(yè)背景消費(fèi)者使∏↔&→用(yòng)時(shí)檢測結果的(de)可£ ‌(kě)靠性。

4.HIV抗體(tǐ)确證試驗試劑

上(shàng)述發光(guāng)類檢測試劑、抗體(tǐ)快(kuàδ™₩i)速檢測試劑和(hé)抗體(tǐ)自(zì)←"測試劑，都(dōu)屬于抗體(tǐ)初篩試驗類試劑範疇，但(dàn)人(§≥'rén)們無法僅根據初篩試驗結果給出受試者感染HIV的(de)結↑₩論。臨床中，對(duì)初篩陽性人(rén)群，需采用(yòng)包括免疫印迹>∞法(WB)，條帶/線性免疫試驗（RIBA/LIA），間(jiā≥¥₹n)接免疫熒光(guāng)(IFA)等方法進行(xíng)複檢試驗，此類♣£試劑被稱為(wèi)HIV抗體(tǐ)确證試驗試劑。

5.HIV核酸檢測試劑

患者感染HIV後，病毒在其體(tǐ)內(nèi)>±快(kuài)速複制(zhì)，當血液中的(de)病毒RNA高π€(gāo)于核酸檢測試劑檢測下(xià)限™§≥≠時(shí)，HIV核酸檢測結果呈陽性，此時(shí)可(k∑γσě)結合流行(xíng)病學史、臨床症狀及HIV抗體≈ (tǐ)初篩結果作(zuò)出判斷。目前認為(wèi)HIV核酸檢測的(d←"e)窗(chuāng)口期可(kě)縮短(duǎn)至1周左右。

除上(shàng)述初篩用(yòng)途外(w©×πài)，HIV核酸定量檢測試劑還(hái)可(kěε←)用(yòng)于臨床管理(lǐ)HIV感染的(de)患者。具€¶體(tǐ)來(lái)說(shuō)，可(kě)通(tōng)過測定基線HΩ÷$♦IV-1RNA水(shuǐ)平，對(duì)患者的(de)預後進行(xín‌↓ ≥g)評價；或在抗病毒治療過程中通(tōng)過測定患γ'§™者血液中HIV-1RNA水(shuǐ)平的(de)變化(huà)來(lái)監<§控抗病毒治療的(de)效果。

6.HIV基因型耐藥檢測試劑

HIV耐藥檢測結果可(kě)為(wèi)艾滋病治療方案的(de)制​ ε(zhì)訂和(hé)調整提供重要(yào)參考。檢測結果為(wèi)HIV耐α≈§ 藥，表示該感染者體(tǐ)內(nèi)病毒可(kě)能(né₽♦←ng)耐藥，同時(shí)需密切結合臨床情況，✘δ✔★充分(fēn)考慮HIV感染者的(de)依從(cóng)性∞α×，對(duì)藥物(wù)的(de)耐受性及藥物(wù)代$§謝(xiè)吸收等因素進行(xíng)綜合評判。

二、注意事(shì)項

HIV感染的(de)高(gāo)風(fēng)險人♥β↔"(rén)群包括有(yǒu)男(nán)男(nán)≥>¶同性性行(xíng)為(wèi)者，靜(jìng)脈注射毒品者ββ，與HIV/AIDS患者有(yǒu)性接觸者σ' ，多(duō)性伴人(rén)群，懷疑接受過不(bù)潔輸血、使用(yòngεφλ↓)過未經嚴格消毒的(de)針具注射的(de≤↓•)人(rén)等。當以上(shàng)人‍©↑(rén)群出現(xiàn)發燒、皮疹、≤✘∞©疲勞、頭痛、腹瀉、淋巴結腫大(dà)等症狀，或懷疑自¥☆¥♦(zì)己可(kě)能(néng)感染HIV時(shí)，可(kě)↑≈到(dào)設置于當地(dì)疾病預防控制€∞&(zhì)機(jī)構或指定醫(yī)療機(<♦π§jī)構的(de)艾滋病自(zì)願咨詢檢測（VCT）門(mén)診/室，¶"☆→接受免費(fèi)且保密的(de)咨詢和(≤‌hé)檢測，也(yě)可(kě)自(zì)行(Ω₩★≈xíng)購(gòu)買自(zì)測抗體(tǐ)檢測試劑，進行(xíng)©π自(zì)我檢測。

消費(fèi)者進行(xíng)自(zì♠<♣∞)我檢測時(shí)應特别注意：由于疾病窗(chuāng)口期的♠≈★γ(de)存在、HIV變異或樣本處理(lǐ)不(bù)當等因素，若檢測結果為(&•Ωwèi)陰性，并不(bù)能(néng)排除HIV感染的↑ ™(de)可(kě)能(néng)性。如(rú)果ε÷§©自(zì)我檢測距離(lí)最近(jìn)一(yī)次高(gāoβ✘)危行(xíng)為(wèi)的(de)Ω• <時(shí)間(jiān)間(jiān)隔在窗(chuāng)口期內(nèi)× ，建議(yì)隔一(yī)段時(shí)間(jiān)再自(z​♣★♠ì)行(xíng)檢測，或到(dào)當地(dì)疾病預防控制(zhì)機♦✘(jī)構或醫(yī)療機(jī)構咨詢檢測。若自(zì)我檢測結果♦✘呈陽性，也(yě)無需過分(fēn)恐慌，因為(wèi)自​≠(zì)我檢測結果僅為(wèi)初篩結果，并不(bù)能 ✔ε(néng)判定檢測者已感染HIV，此時♦∏φ♣(shí)，應向所在地(dì)的(de)疾病預防控制(zhì)機(jī)‍ ♣構或醫(yī)療機(jī)構進行(xíng)咨詢，并做(zuò→π∑)進一(yī)步檢測來(lái)确診HIV感染€'狀态。

目前，國(guó)家(jiā)已批準了(le)♣♥α•多(duō)個(gè)用(yòng)于HIV感染檢測的(de)試劑，用↔★&(yòng)途覆蓋艾滋病的(de)診斷、病情監測和(hé)用(yò​ ng)藥指導。就(jiù)使用(yòng)人(rén)群來(lái)區(qū"¥¶)分(fēn)，獲批産品包括實驗室檢測試劑和(hé)消費♥>$(fèi)者自(zì)測試劑。需注意的(d×☆ e)是(shì)，目前可(kě)選擇的(de)所有(λ♠Ω✘yǒu)檢測試劑都(dōu)有(yǒu)™λ"各自(zì)的(de)用(yòng)途和(hé)局限性，使用(yòng)時(s‍♠✘hí)應根據用(yòng)途和(hé)行(xíng)業∏↑φ(yè)技(jì)術(shù)規範，确定HI☆₽β✔V感染檢測策略。

微(wēi)衛星不(bù)穩定性（MSI）檢測概述

一(yī)、微(wēi)衛星不(bù)穩定性（MSI）簡介

微(wēi)衛星不(bù)穩定性（Microsatellite Ins∑÷tability，MSI），是(shì)指由于在DNA複制(z★'hì)時(shí)插入或缺失突變引起的(de)微(wēi✘γ☆)衛星（Microsatellite, MS）序列長(chán×φg)度改變的(de)現(xiàn)象，常由錯(cuò)配修複功能(±↔néng)（Mismatch repair‍£ ★, MMR）缺陷引起。MS序列，是(shì)一(yī)些(xiē)短(du™&§ǎn)而重複的(de)DNA序列，一(yī)般由1～6個(gè)核苷酸組成，<δ₽串聯重複排列，常見(jiàn)類型為(wèiσ♥$♣)雙堿基CA/GA/GT或單堿基A/T等。MS序© ±π列可(kě)以位于基因的(de)重要(yào)非編碼區(qū)，也(yě)可(•λ ♥kě)以位于基因的(de)編碼區(qū)，多(duō)态性分(fēn‍®₹)布于整個(gè)基因組，個(gè)體(tǐ)差∞​異大(dà)。

MSI現(xiàn)象于1993年(nián)被Jacobs等人(r×≥¥>én)在結直腸癌中首次發現(xiàn)。随著(zhe)針對(duì)‌×£©MSI的(de)研究深入，發現(xiàn)MSI現(xiàn)象​♥÷不(bù)止存在于結直腸癌，在子(zǐ)宮​σ¥內(nèi)膜癌、胃癌、肝細胞癌、乳腺癌等實體(tǐ)瘤中均有(y$$™ǒu)發生(shēng)。

二、MSI檢測方法

目前檢測癌細胞中的(de)MSI時(shí)，既可(kě)以通δα★&(tōng)過檢測MMR基因缺失來(lái)确定是★×☆¶(shì)否發生(shēng)MSI，如(rú)π←→依賴于免疫組化(huà)技(jì)術(shù)的(de)蛋白(bái)Ω₽δ♥水(shuǐ)平檢測，也(yě)可(kě)以直接檢測MSI的(de)序列變化(≈₩huà)，如(rú)PCR（聚合酶鏈反應）檢 <★α測等的(de)分(fēn)子(zǐ)水(shuǐ)平檢測。

（一(yī)）免疫組化(huà)方法（Immunohistoche←₩δmistry, IHC）

常見(jiàn)的(de)方法為(wèi)采用(yòng)免疫組織化(huà)∑←學方法檢測腫瘤組織中錯(cuò)配修複基因MLH1、MSH2、M←ΩSH6及PMS2的(de)表達。任何一(yī)項錯(cuò)配修複基因表達α≥₹¶缺失，被定義為(wèi)MSI，否則即為(wèi)微(wēi)衛星穩定（MS♣ε↕₩S）。其中一(yī)個(gè)表達缺失則稱為(wèi)低(dī)φα度微(wēi)衛星不(bù)穩定(MSI-L)，2種或2×∏種以上(shàng)蛋白(bái)表達缺失為(wèi)高(gāo)度微& (wēi)衛星不(bù)穩定(MSI-H✘ )。

此方法檢測MSI相(xiàng)對(duì)較簡單，成✘✘∞本較低(dī)。但(dàn)存在一(yī)些(x≤≠iē)問(wèn)題，如(rú)使用(yòng)抗體(tǐ)αφ∞的(de)不(bù)一(yī)緻、病理(lǐ)醫(yī)生(shēng)£☆λ£的(de)閱片标準不(bù)一(yī)緻等。

（二）分(fēn)子(zǐ)水(shuǐ)平的↓<"(de)檢測

1.聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, P≤•‍CR)技(jì)術(shù)

目前主要(yào)采用(yòng)多(duō)重熒光(guāng)×π≈PCR結合毛細管電(diàn)泳的(deσ•♠≈)方法。通(tōng)過PCR方法檢測特異的(de)微(wēi)衛星重複序列♣δ ≥擴增判定MSI狀态，比較腫瘤患者的(de)标本組織與正常組織的(d©φe)位點突變情況。其比較的(de)位點為(wèi)美α (měi)國(guó)國(guó)家(jiā)癌症研究所（NCI）推薦的(→™>de)5個(gè)微(wēi)衛星位點：BAT25、BAT26、D5S346、​♥•D2S123及D17S250。其中≥2個(gè)位點發生(shēng)改變判定✘Ω✔為(wèi)高(gāo)度微(wēi)衛星不(bù)穩定（MSI-H），↕ §僅1個(gè)位點發生(shēng)改變判定為(wèi)低(dī)度©Ω微(wēi)衛星不(bù)穩定（MSI-L），無位點改變判定為(wèφ✘•✔i)微(wēi)衛星穩定（MSS）。有(yǒu)研究認γ∑→為(wèi)，二核苷酸重複序列的(de)特異性和(hé)靈敏↕§♣度比單核苷酸重複序列要(yào)低(dī)，★ελ因此關于最适合MSI檢測的(de)位點仍存在争議(yì)。Bacher等π₽‍對(duì)266個(gè)微(wēi)衛星位點(其♣∞≠中包括單核苷酸、二核苷酸、四核苷酸以及五核苷酸微(wēi)衛星位點)δ₽®檢測的(de)敏感性及準确性進行(xíng)'®σ評估，提出了(le)Promega分(fēn)析系統，該系統使€ €用(yòng)五個(gè)單核苷酸微(wēi)衛星位點(B∞‍♦©AT-25, BAT-26, NR-21, NR"★-24和(hé)MONO-27)及兩個(gè)五核÷★苷酸微(wēi)衛星位點(Penta C和(hé)Penta ± '✔D)檢測MSI。

大(dà)量的(de)實驗證實，MMR免疫組化(huà)檢測結<σ果與MS的(de)PCR檢測結果有(yǒu)高(gāo)度關聯性，π♣ 靈敏度92%，特異性可(kě)達100%。

該方法目前是(shì)檢測MSI的(de)方法學“金'π÷(jīn)标準”，但(dàn)操作(zuò∑₩≤')過程複雜(zá)，花(huā)費(fèi)較高(gāo)，且在結σ®♦果判斷中會(huì)碰到(dào)以下(xià®™×)問(wèn)題，如(rú)熒光(guāng)的 ✔∑(de)過強或過少(shǎo)、非特異性峰、不(bù)顯著的‌≤₽(de)峰大(dà)小(xiǎo)改變，雜(zá)合性γ♦÷₩缺失等。

2.新一(yī)代測序方法（Next Genε↑↕eration Sequencing, NGS）

NGS又(yòu)稱為(wèi)第二代測序δ αα技(jì)術(shù)，是(shì)一(yī)種高(gāφ®o)通(tōng)量測序技(jì)術(shù)，能(néng)一(y ✘ī)次性對(duì)幾十萬到(dào)幾百萬條基因分(fēn)子(zǐ)進行∑ ​✔(xíng)序列測定。目前NGS方法已經成✔εσ↑為(wèi)檢測MSI的(de)新工(gōng)具，其最大(d±≠à)優勢是(shì)可(kě)以實現(xiàn)多(d∞<™♥uō)位點高(gāo)通(tōng)量檢測。紀念斯隆·凱特琳癌症研究中心δ←（Memorial Sloan Ketter≥βing Cancer Center，MS‍≈¶ K）的(de)一(yī)項研究使用(yòn£π g)NGS方法對(duì)12,288例實體(tǐ)瘤♥₹病人(rén)進行(xíng)檢測，判定M$φSI狀态，并用(yòng)MSI-PCR/MMR-IH✘≈¶δC進行(xíng)了(le)驗證。實驗證明(míng), NGS方法較MSI-​×PCR方法具有(yǒu)更高(gāo)的(de)敏感性。

三、MSI檢測的(de)臨床意義

目前，有(yǒu)關MSI檢測的(de)臨床意義有(yǒu)如(rú)下(x¶εià)觀點：

（一(yī)）Lynch綜合征的(de)篩查

Lynch綜合征，亦稱遺傳非息肉病性結直腸 ±π×癌（HNPCC），是(shì)一(yī)種呈家(jiā)族遺傳傾向的ε♣φ♠(de)常染色體(tǐ)顯性遺傳病，由于MMR基因發生(shēngλ$•)胚系突變所緻，約占所有(yǒu)結直腸癌（Colorectal carcin₽®oma, CRC）3%～5%。Lynch綜合征最突出的(de)特點之§π一(yī)是(shì)攜帶者本人(rén)或>$ Ω家(jiā)族成員(yuán)可(kě)發生(sβ>₹hēng)CRC及其他(tā)多(duō)種Lynch相(xià♠×ε₹ng)關腫瘤。MSI是(shì)Lynch綜合征的(de)特征性分(fēn)子 $δ•(zǐ)，約90%以上(shàng)表現(xiàn)出MSI。同時(shí)并♦•↓不(bù)是(shì)所有(yǒu)的(de)MSI均是(€γshì)Lynch綜合征，在散發性CRC中↔γα也(yě)存在10%～15%的(de)MSI。

（二）MSI與結直腸癌的(de)預後

臨床研究證實，MSI與結直腸癌的(de)預×♥×後有(yǒu)著(zhe)密切的(de)關系。MSI-H <↔↓結直腸癌患者相(xiàng)比MSS患者具有(yǒu)顯著的(de) ★≠£生(shēng)存優勢，臨床表現(xiàn)較差，但(dàn↕ )預後更好(hǎo)。研究證實，針對(duì)Ⅱ/Ⅲ期結直腸癌患者&÷α，MSI-H患者的(de)總生(shēng)存期及無病生(shēn‌​αg)存期明(míng)顯延長(cháng)₽★↑✔。美(měi)國(guó)國(guó)家(jiā)綜合癌症網絡（Nat∑☆δ§ional Comprehensive Cancer Network，NCCN≤∏≥¶）發布的(de)結直腸癌指南(nán)，建議( ↑yì)MSI檢測應在所有(yǒu)結直腸癌史的(de)病人(rén)中₽>±進行(xíng)。

（三）MSI與指導用(yòng)藥

研究證實，MSI-H的(de)結直腸癌Ⅱ期患者不(bù)能(néng)♠δ在氟尿嘧啶（5-FU）治療中獲益。同時(shí)因MSI-H的(de)晚期結直σ€‌腸癌患者通(tōng)常具有(yǒu)PD-1及P∏π≈DL-1等的(de)高(gāo)表達，可(kě)通(tōng)過對(d≥← uì)PD-1/PD-L1的(de)靶向抑制(zhì)，促使機(jī)體(tǐ®₽)免疫系統攻擊和(hé)殺滅腫瘤細胞。目前美≈±§>(měi)國(guó)FDA已批準PD-1免疫治療單抗pe±‍♦mbrolizumab、ipilimumab和(hé)nivolumabπ₹& 用(yòng)于具有(yǒu)錯(cuò)配修複缺陷（dMMR）/ ✔MSI-H表型的(de)轉移性結直腸癌（mCRC）的(de)末₩§<♠線治療。除了(le)mCRC的(de)治療外(wài)，2017年(niá ≥↑n)5月(yuè)，美(měi)國(guó)FDA批準了(le)πλ÷¶PD-1抗體(tǐ)pembrolizumab用(yòng)于治療π↕成人(rén)和(hé)兒(ér)童具有(yǒσ↔u)dMMR/MSI-H表型的(de)沒有(yǒu)其他(tā)治療選擇的(d§∏♥e)，不(bù)可(kě)切除或轉移性實體(tǐ)✘≥∏ 瘤患者。

《中國(guó)結直腸癌診療指南(nán)》（20©→10版）就(jiù)明(míng)确了(leγ¥)“Ⅱ期結直腸癌，有(yǒu)條件(jiàn)&∏者建議(yì)檢測組織标本MMR或MSI，如(rú)為(wèi&♦)dMMR或MSI-H，不(bù)推薦氟尿嘧啶類藥物(w₩₩ù)的(de)單藥輔助化(huà)療”。在《中國(guó)結直"$β腸癌診療指南(nán)》（2017版）的(de)組織病理(lǐ)學檢查部分​λ(fēn)，增加了(le)MMR或MSI的(de)檢測作(zuò)為( ∞wèi)複發或轉移性結直腸癌的(de)推薦檢測方法，“∑• ∞确定為(wèi)複發或轉移性結直腸癌時(shí)，推薦檢測腫瘤組織K-ras及÷≠ΩN-ras基因、BRAF基因、錯(cuò)配修複蛋白(bái)表<☆ 達或微(wēi)衛星狀态及其他(tā)相(xiàng)關基因狀态以指導進一¥ Ω(yī)步治療。”

四、相(xiàng)關檢測産品介紹

目前國(guó)際上(shàng)已上(s✘‍♠÷hàng)市(shì)的(de)産品有(yǒu)：

（一(yī)）MSI-IVD Kit (FALCO)

日(rì)本FALCO公司的(de)MSI-IVD Kit已獲得(de ¶)日(rì)本厚生(shēng)勞動省的(de)批準上(s ↓±σhàng)市(shì)。該試劑盒采用(yòn ↕¶σg)PCR技(jì)術(shù)檢測癌組織中提取的(☆‌de)基因組DNA中的(de)MSI狀态，檢測7個(gè)微(wēi)衛↕σ星位點（五個(gè)單核苷酸微(wēi)衛₩$​星位點BAT-25, BAT-26, N☆"R-21, NR-24和(hé)MONO-27及兩個(gè)五核苷酸微(wē≤φδπi)衛星位點Penta C和(hé)Penαεta D）。該産品由日(rì)本FALCσΩ©O公司與Promega公司合作(zuò)開(kāi)發，作(zuò)←×→為(wèi)伴随診斷試劑，用(yòng)于指λ£導PD-1抗體(tǐ)pembrolizumab在局部♠₩晚期或轉移性癌症患者中的(de)應用(yòng)。

（二）VENTANA MMR IHC panel

該産品采用(yòng)IHC方法檢測經福爾馬林(lín) ☆​✔固定石蠟包埋的(de)結直腸癌組織切片中的(de)四種MMR蛋白∏ ✔"(bái)MLH1、MSH2、MSH6、PM↓₽S2，及BRAF V600E

突變蛋白(bái)。用(yòng)于Lynch綜合征的(de)輔助∏λ診斷，同時(shí)檢測BRAF V600E突變蛋白(b‌★φái)用(yòng)于散發性CRC及Ly÷↔nch綜合征的(de)輔助鑒别診斷。此産品通(tōng)過De Novo途$$¥徑在美(měi)國(guó)上(shàng)市(sh✘∏ì)。

（三）MSK-IMPACTTM

2017年(nián)11月(yuè)16日(rì)，美( δměi)國(guó)FDA批準紀念斯隆·凱∞β♣φ特琳癌症研究中心（Memorial Sloan K€←ettering Cancer Cent★<er，簡稱MSK）基于二代測序技(jì)術(shù)的(≈≥☆£de)癌症基因檢測分(fēn)析平台MSK-IMπ✘$ PACTTM。該産品能(néng)夠一(yī)次對(d©≈uì)病人(rén)腫瘤468個(gè)基因的(de±≥σ)突變進行(xíng)檢測，并且可(kě)以檢測MSI基因組特征。該産品僅±≈σ限于在MSK中進行(xíng)使用(yòng)，其檢測結果不(♦β€bù)與任何藥物(wù)聯用(yòng)。該産品的✔•(de)MSI的(de)檢測性能(néng)通(tōn♠®✔g)過對(duì)10,900名患有(yǒu)66種不(bù¶↓₩)同類型晚期實體(tǐ)瘤患者的(de)研究進行(xíng)确定。

（四）FoundationOne CDx (F1CDx)

2017年(nián)11月(yuè)30日(rφ‍↑←ì)，美(měi)國(guó)FDA批準了(le)Fo∞£undation Medicine公司針對©λ(duì)多(duō)種實體(tǐ)瘤的(de)二代測序的(de©∑<✔)體(tǐ)外(wài)檢測産品—FoundationOnβ☆₩​e CDx（F1CDx）。該産品僅允許在Foundation ÷ασ>Medicine公司進行(xíng)檢測。這(zhè)款産品除了(le¥∏§)可(kě)檢測5種腫瘤中的(de)324個(gè)基因↕♣↔↑的(de)突變，還(hái)可(kě)以★&'檢測MSI和(hé)腫瘤突變負荷（TMB）兩個(gè)基因組特征，是(shì'©₹)FDA批準的(de)首款獲得(de)突破性認定的(de)癌症NGS體(t€‍☆✔ǐ)外(wài)診斷檢測産品。

五、總結

随著(zhe)研究的(de)進一(yī)步深入，MSIφ≥&‍在腫瘤的(de)發生(shēng)機(jī)制(zhì)中所起的(de>←↓)作(zuò)用(yòng)越來(lái)越被人(rén)們所關注。雖然近☆σ(jìn)年(nián)來(lái)MSI的(de₹≠​≈)檢測在臨床應用(yòng)方面被日(rì↑γ↔✔)趨關注，但(dàn)是(shì)國(guó)內(n‌ èi)還(hái)未有(yǒu)注冊獲批的(de)産品。201↓∏8年(nián)已有(yǒu)MSI檢測試劑盒通(tōng)過國(guó)家≠≤↑​(jiā)藥品監督管理(lǐ)局的(de)創新醫(yī)療器(q&₽ >ì)械特别審查程序，該産品采用(yòng)熒光(guāng)PCR-毛細管電('∏diàn)泳法。

如(rú)何判定一(yī)個(gè)體(tǐ)外(wà≥‌i)診斷試劑是(shì)否屬于防治罕見(jiàn)病相(xiàng)關産品λ¥

體(tǐ)外(wài)診斷試劑産品是(shì)否屬于防治±γ£罕見(jiàn)病相(xiàng)關産品，↔€✘應依據《罕見(jiàn)病防治醫(yī)療器(qì)械注冊✔φ審查指導原則》（2018年(nián)第101号）、《關于公布第一(yī)批罕•Ω ≥見(jiàn)病目錄的(de)通(tōng)知(zhī)》（國(¶♠βαguó)衛醫(yī)發〔2018〕10号）及《®‍國(guó)家(jiā)衛生(shēng)α• 健康委辦公廳關于印發罕見(jiàn)病診療指南(nán)（2019年(ni§↑án)版）的(de)通(tōng)知(zhī)》（國£↑‌(guó)衛辦醫(yī)函〔2019〕198号）等文(wén)件↓∞™(jiàn)判定。如(rú)申報(bào)産品臨床适用(yòng)<♦症為(wèi)第一(yī)批罕見(jiàn)病目錄≈ ≠<中的(de)疾病，且依據罕見(jiàn)病診療指南(nán)（20₹∑>φ19年(nián)版），該疾病的(de)診療流程中需進行(xíng)申報(α→§bào)産品對(duì)應的(de)檢測項目的(de)檢測，則該産 ✘品可(kě)認定為(wèi)防治罕見(jiàn)病相(xiàng)關産品。對​✔(duì)于申報(bào)産品檢測項目為(wèi)新>←"研發的(de)生(shēng)物(wù)标志(zhì)物<←(wù)，應明(míng)确産品預期用(yòng)途及其γ←β與相(xiàng)關罕見(jiàn)病診療的₩ π←(de)關系,從(cóng)而判定其是(shì)否屬于防治✔♣♠♥罕見(jiàn)病的(de)産品

血氣檢測類産品适用(yòng)的(de)樣©¥÷ 本類型是(shì)什(shén)麽

臨床應用(yòng)中，血氣檢測類産品（包括儀→$$®器(qì)和(hé)試劑）的(de)樣本類型一(yī)般為(wèi)動脈全‍'​✔血。審評過程中依據注冊申報(bào)資料的(de)驗證內(n☆ ≈↓èi)容，一(yī)般将适用(yòng)樣本類型明(mí₽∑÷©ng)确為(wèi)動脈全血。如(rú)果産品适用(yòng)于檢±©測靜(jìng)脈全血、毛細血管全血等其他(tā©♥≤)樣本類型，亦應進行(xíng)充分(fēn)驗×£'證。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑的(de)配套質控品有(yǒu)何要↓÷πα(yào)求

體(tǐ)外(wài)診斷試劑的(de)配套質控品用(y¶∏òng)于對(duì)檢測系統進行(xíng)質量控制(zhì<∞♠←)。申請(qǐng)人(rén)應對(duì)申↓ ↕報(bào)試劑檢測質控品的(de)預期結果（靶值和(hé)靶值範圍）ε♥‍進行(xíng)驗證，并将經驗證的(de)配套質控品在₽≠試劑說(shuō)明(míng)書(shū)中予以明(míng)确。未經驗γδ♠證的(de)“第三方質控品”、“其他(tā)商用(yòng)質控品”等↔₩表述不(bù)應出現(xiàn)在産品說(shuō)明(mín₹♠↑g)書(shū)中。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑臨床試驗中，能(néng)♣‌♠ 否采用(yòng)境外(wài)已上(shàng)市(shì)同類産品作↕&♣(zuò)為(wèi)對(duì)比試劑

體(tǐ)外(wài)診斷試劑的(de)臨床試驗一(yī)般采用(±β§↓yòng)試驗用(yòng)體(tǐ)外(wài)診斷試劑與臨床參•♣​←考标準和(hé)/或已上(shàng)市(sh∞™"ì)同類産品進行(xíng)比較研究的(de)方法，評價試驗用φ♠(yòng)體(tǐ)外(wài)診斷試劑的(de)臨床性能(néng)，$₹♦為(wèi)該産品安全、有(yǒu)效性的(de)确認提供<♦科(kē)學有(yǒu)效的(de)臨床♦α₩φ證據。其中，“已上(shàng)市(shì)同類産品”指的(de)是(shì)≠γ​♠境內(nèi)批準上(shàng)市(shì)的(de)同類産品。

對(duì)于目前臨床上(shàng)沒有(yǒu)可(k£®×↕ě)參照(zhào)的(de)臨床參考标準或現(xiàn)有(yǒu©β™)臨床參考标準不(bù)能(néng)全面評 ®€¶價産品臨床性能(néng)的(de)情況，臨床↔•★試驗設計(jì)時(shí)，在确認被測物(wù)臨床檢測意≠©α義的(de)前提下(xià)，還(hái)應依®∞據現(xiàn)有(yǒu)臨床實踐和(hé)理(lǐ)論基礎§™選擇适當的(de)實驗室方法進行(xíng)檢測性能(néng)✘<評價，例如(rú)：與臨床公認的(de)、标準化(huà)的(↑♣de)實驗室參考方法進行(xíng)對(∏∑←Ωduì)比試驗。如(rú)果有(yǒu)境外(wài)已批準∞φ​上(shàng)市(shì)的(de)同類産品，與試驗用(yò γ↑ng)體(tǐ)外(wài)診斷試劑具有(yǒu)相≥•♥¶(xiàng)同的(de)預期用(yòng)途，且該産品經過↕™了(le)充分(fēn)的(de)性能(néng)驗證和(h​¶é)确認，實驗室檢測過程中可(kě)實現(xiàn)良好(hǎo)的(de∞♠÷)質量控制(zhì)，并被臨床廣泛認可(kě)能(néng)夠用(y≥©$↑òng)于相(xiàng)關标志(zhì)物(wù)檢測，則該産品亦可γδ(kě)作(zuò)為(wèi)實驗室檢測方法用(yòng)作₽‌ (zuò)對(duì)比方法。

eRPS系統注冊申報(bào)申請(qǐng)表中IVD産品分×♥✔€(fēn)類編碼應如(rú)何選擇

按照(zhào)《關于實施醫(yī)療器(qì)械注冊電(diàn)子(z¥ "ǐ)申報(bào)的(de)公告》（2019年(niá☆&←βn)第46号）的(de)要(yào)求，自(zì)2019年(nián)6月(σ✘ ≥yuè)24日(rì)，正式啓用(yòng)eRπ¥PS系統。eRPS系統中，體(tǐ)外(wà©&&i)診斷試劑申請(qǐng)表分(fēn)類編碼一(yī)∞©欄除固定6840外(wài),增加了(le)對(duì)6840細化(huà)₽₽↓的(de)産品類别名稱,申請(qǐng)人(rén)/注冊人(r₩α←εén)可(kě)在下(xià)拉菜單中選擇。以下(xià)就(jiù)該♥↕‌細化(huà)的(de)分(fēn)類編碼的(de)選擇逐一↕∑★ε(yī)說(shuō)明(míng)：

1、23-001：與中華人(rén)民(mín)共和(hé)ε☆國(guó)傳染病防治法所述疾病相(xiàng)關>★的(de)病原體(tǐ)檢測試劑；

此類産品僅包括《中華人(rén)民(mín)共和(hé↑§∑$)國(guó)傳染病防治法》中所規定的(de)‍™甲類、乙類和(hé)丙類傳染病相(xiàng)關的(de)病<≤≥原體(tǐ)檢測試劑。

2、23-002：除23-001外(wài)其它緻病性病≈→→♦原體(tǐ)抗原、抗體(tǐ)以及核酸等相(x✔★iàng)關的(de)檢測試劑；

本類産品包括除《中華人(rén)民(mín)共和(hé)國(guó)傳染病α•↓↕防治法》中所規定的(de)甲類、乙類和(hé↓€∞)丙類傳染病以外(wài)的(de)其他(tā)緻病性病原體(tǐ)↕₽相(xiàng)關的(de)檢測試劑，如(rú)幽​•≠←門(mén)螺杆菌、沙眼衣原體(tǐ)、白(báφ≈∞i)色念珠菌、人(rén)乳頭瘤病毒、EB病毒、單£β純疱疹病毒等。

3、23-003：與血型、組織配型相(xiàng)<‌∏∑關的(de)檢測試劑；

本類産品指ABO、Rh等血型檢測試劑、血小(xiǎo)闆抗體(tǐ)、抗★"✔ 人(rén)球蛋白(bái)、紅(hóng)細胞抗體(tǐ)檢測試劑以及H‌☆ αLA-DNA分(fēn)型檢測試劑等。

4、23-004：與人(rén)類基因、遺傳性疾病相(xiàng)關的(de₽↕↑€)檢測試劑；

如(rú)染色體(tǐ)非整倍體(tǐ)(DNA)、CYP2C19₩'基因等人(rén)類基因相(xiàng)關✘‍"¶的(de)檢測試劑以及遺傳性耳聾基因檢測、苯丙氨酸檢測ασ±€等遺傳性疾病相(xiàng)關的(de)檢測試劑。

5、23-005：與免疫組化(huà)、原位雜(zá)交、流®♥≈式細胞分(fēn)析儀配套相(xiàng)關檢測試σ↔$劑；

指采用(yòng)免疫組化(huà)、原位雜(zá)交、流式技¥↔(jì)術(shù)的(de)相(xiàng)關檢​γ×φ測試劑，且依據《總局關于過敏原類、流式細胞儀配套用(yòng)、免疫組化(hu¥←♠™à)和(hé)原位雜(zá)交類體(tǐ)外(wài)診斷試♦∏≈劑産品屬性及類别調整的(de)通(tōng)告》（20§​ ✔17年(nián)第226号）按照(zhào)< ±→第二類和(hé)第三類體(tǐ)外(wài)診斷試劑管πσβ∏理(lǐ)的(de)産品；

6、23-006：除列入免臨床目錄的(de)腫瘤标志(zhì)✔γ∏±物(wù)以外(wài)的(de)其它與腫瘤相(xiàng)關的(de∑™σ)檢測試劑；

本類産品是(shì)指除列入免臨床目錄的(de)腫瘤标志(zhì)& ₽ 物(wù)以外(wài)的(de)其他(tā)腫瘤相(xφ©iàng)關檢測試劑，如(rú)甲基化(huà)檢測等。

7、23-007：列入免臨床目錄的(de)腫瘤标志(zh≥€♥ì)物(wù)相(xiàng)關的(de)檢測試劑；

本類産品僅包括已列入免臨床目錄的(de)腫瘤σπ标志(zhì)物(wù)相(xiàng)σ≈關的(de)檢測試劑，如(rú)甲胎蛋白(σ×≈bái)（AFP）、癌胚抗原（CEA）等。

8、 24-001：用(yòng)于蛋白(bái)質檢測的(de)試πδ劑；

　　24-002：用(yòng)于糖類檢測的(de)試₹→‌劑；

　　24-003：用(yòng)于激素檢測的π׶(de)試劑；

　　24-004：用(yòng)于酶類檢測的÷₽σ♦(de)試劑；

　　24-005：用(yòng)于酯類檢測的(de)試劑；

　　24-006：用(yòng)于維生(shēng)素檢測的(deβ$)試劑；

　　24-007：用(yòng)于無機(jī)離(lí)子(z¥≠¶ǐ)檢測的(de)試劑；

　　24-008：用(yòng)于藥物(wù)及藥物(wù)代謝(xi±←±δè)物(wù)檢測的(de)試劑；

　　24-009：用(yòng)于自(zì)身(shēn)抗✔∑體(tǐ)檢測的(de)試劑；

　　24-010：用(yòng)于變态反應≈β↔<（過敏原）檢測的(de)試劑；

　　24-011：與麻醉藥品、精神藥品、醫(yī)療用(yòng)毒性藥品檢•©測相(xiàng)關的(de)試劑；

　　24-012：用(yòng)于其他(tā)'♣β♥生(shēng)理(lǐ)、生(shēng)化(huà)或者免疫功能(↑ ₩‍néng)指标檢測的(de)試劑；

　　24-013：用(yòng)于微(wēi)↓™生(shēng)物(wù)鑒别或者藥敏試驗的(de)試劑；λ™•

自(zì)24-001至24-013，與《6840體(tǐ)外(w¶Ω★ài)診斷試劑分(fēn)類子(zǐ)目錄》（201 ♦3版）一(yī)緻。

以上(shàng)細分(fēn)的(de)IVD分(fēn)類編碼±↔對(duì)于申報(bào)資料提交至eRPS系統後能(néng)π‌'∏否進入正确的(de)分(fēn)配路(lù)徑至關重要≥ >≈(yào)，申請(qǐng)人(rén)/注冊人(rén)應重視(shì)并正εδπ确進行(xíng)選擇，如(rú)出現(xiàn)&©選擇錯(cuò)誤的(de)情況，請(qǐng)于立卷審查環節發補Ω"÷α後進行(xíng)更正。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑産品技(jì)術(←±γ£shù)要(yào)求附錄中主要(yào)原材料的(de)供應商該如(rú)何↓'β填寫

體(tǐ)外(wài)診斷試劑産品技(jì)術(shù)要(yào)求Ω♠π₩附錄中要(yào)求标注主要(yào)原材料的(de≠ λ₹)來(lái)源,如(rú)為(wèi)外(w∏♦☆ài)購(gòu)應寫明(míng)供應商。此處的(de)供應商應為(wèi)←✘原材料的(de)生(shēng)産商,而不(bù)是(shì)經銷商或代理(lγ→→ǐ)商。相(xiàng)應的(de)，注冊變更情形中主要(yào)原材∑£®料的(de)供應商的(de)變更是(shì)指原材料的(de)生(s≥ ​hēng)産商發生(shēng)變化(huà)的(de)情形。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑臨床試驗中如(rú)采用(yòng)核酸序↔™列測定、GC-MS/MS等實驗室檢測參考方法作(zuò)為(wèi)對(duì&< ​)比方法進行(xíng)比較研究,是(shì)否可(♥≠αφkě)以委托測試

對(duì)于某些(xiē)目前臨床上(shàng)尚不(bù)​™€ 存在明(míng)确的(de)臨床診斷“金(jīn)标準”，亦無¶®™"可(kě)比的(de)同類産品上(shàng)市(shì)的(de)體( $¶tǐ)外(wài)診斷試劑，臨床試驗研究者∞≠★'應依據現(xiàn)有(yǒu)臨床實踐和(hé)理(lǐ)論₩£±σ基礎，建立合理(lǐ)的(de)方法，進行(xíng)比較研究₽✘÷✘。對(duì)于部分(fēn)體(tǐ)外(wài)診斷β≤Ω<試劑，臨床試驗中采用(yòng)核酸序列測定、GC-Mπ✘♥₽S/MS等實驗室檢測參考方法作(zuò)為(wèi)對(duì)÷σ比方法進行(xíng)比較研究，這(zhè)些(xiē)‍→γγ方法非臨床常規檢測技(jì)術(shù)，需要(yào)專門(mé☆φ n)的(de)設備儀器(qì)和(hé)試驗條件(jiàn)，且臨床試驗機( α¶jī)構可(kě)能(néng)不(bù)具備相(xπ$±∑iàng)關檢測條件(jiàn)。對(du®®‍ì)于此類情況，申請(qǐng)人(rén)應盡可(kě)能(né♦γ$¥ng)選擇具備相(xiàng)應條件(jiàn)的(de)臨床試驗機(→←Ωjī)構開(kāi)展臨床試驗，确無檢測條件($$←<jiàn)的(de)部分(fēn)臨床試驗機(jī)構可(kě)将此部分 ∑•(fēn)測試委托給專門(mén)的(de)測序機(jī)構、具備一(y✔€ī)定檢測資質的(de)實驗室進行(xíng)φγδ檢測，并對(duì)檢測結果進行(xíng)認可(kě)。應×&↔提交臨床試驗機(jī)構與受委托機(jī)構的(de)委托證明(míng)文★∏(wén)件(jiàn)，并評價對(duì)比方法的(de)方法學研究和'∞≠∏(hé)整體(tǐ)質量。不(bù)得(de™♥)委托申請(qǐng)人(rén)的(d↓✔β≈e)實驗室進行(xíng)相(xiàng)關測試。

新研制(zhì)試劑的(de)配套專用(yòng)儀器(qì)尚未取得(de♦ ₩↑)注冊證，是(shì)否可(kě)以申請(qǐng)試劑注冊

對(duì)于新研制(zhì)體(tǐ)外(wài)診斷試劑及其配套專用≥ ‌(yòng)儀器(qì)，由于分(fēn)屬不(bù)同的(de☆☆✔)法規管理(lǐ)，因此需分(fēn)别提交注冊申請(q© ←‍ǐng)。但(dàn)試劑及其專用(yòng) ✔儀器(qì)檢測性能(néng)的(de)驗證和(hé)确認是(shΩγì)密不(bù)可(kě)分(fēn)的(de)整體(tǐ)驗證過程γ< ，因此，在試劑和(hé)儀器(qì)均已定型的(de)情況下(xià)，并不₽® (bù)限定試劑和(hé)其配套專用(yòng)儀器(qì)的(de"★)上(shàng)市(shì)順序。但(dàn)試劑注冊申請(qǐn$®λg)時(shí)，應能(néng)夠确保配套儀器(qì)及檢測系統定型★₩↕，如(rú)使用(yòng)非本企業(yè)生(shλ>§ēng)産的(de)儀器(qì)，則所使用(yòng)配套儀器(qì)λ≠應已作(zuò)為(wèi)醫(yī)療器(qì)械在中國(guó)境λ★↑內(nèi)上(shàng)市(shì)，并能(néng)夠對(d÷<uì)其在配套儀器(qì)上(shàng)的(de)性能(néng≥÷ ‍)進行(xíng)全面驗證和(hé)确認。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑臨床試驗中能(néng)否使用(yòng←​')凍存樣本

體(tǐ)外(wài)診斷試劑産品臨床試驗中需使用(yòng)符合入組标"β準的(de)病例樣本進行(xíng)試驗，在具體(tǐ)樣本入組時¥‍(shí)除注意病例的(de)選擇外(wài)（此部分☆↔(fēn)內(nèi)容見(jiàn)共性問(wè☆∏↔n)題“關于體(tǐ)外(wài)診斷試劑臨床試驗入組病$± ≈例樣本的(de)常見(jiàn)問(wèn)£≤←₹題”），還(hái)應注意樣本的(de)保存條≥₩≠件(jiàn)。原則上(shàng)，臨床試驗樣本的(de)使用φ★<✔(yòng)應最大(dà)可(kě)能(né¥✘→πng)與試劑臨床使用(yòng)過程中樣本的(de)狀态一(yī)緻，如(r≤•✘•ú)臨床使用(yòng)狀态為(wèi)新鮮采集後檢測，則✔↑→★應考慮使用(yòng)新鮮采集的(de)樣本進行(xíng)臨床試驗。如(→δrú)臨床使用(yòng)過程中可(kě)能(néng)存在樣本保存過程（₽₹如(rú)一(yī)定條件(jiàn)下(xià)π δε凍存），且說(shuō)明(míng)書(shū)中樣 ↔Ω←本保存條件(jiàn)明(míng)确了(le)相(xiàn₽↔g)應的(de)樣本保存條件(jiàn)及‌₽有(yǒu)效期，則臨床試驗中亦可(kě→♦")納入部分(fēn)相(xiàng)應保存條件(jiàn)下(xià)的(dβ​e)樣本。無論使用(yòng)新鮮采集樣本還(hái) ÷ ≥是(shì)凍存樣本，均應确保入組樣本的(de‍±)保存條件(jiàn)和(hé)期限符合相(∏∏ εxiàng)應産品樣本保存的(de)要(Ω✘♠yào)求。

體(tǐ)外(wài)診斷試劑産品說(shuō)明(míng)書(&¥↓¶shū)“标識的(de)解釋”項涉及修改如(rú)何執行(xíng)

按照(zhào)《總局辦公廳關于體(tǐ)外(δ↔↑σwài)診斷試劑說(shuō)明(míng)書(shū)文(wén)字性™‌≈ 變更有(yǒu)關問(wèn)題的(de)通(tōng)知(zhε•↓÷ī)》（食藥監辦械管[2016]117号 >∞），體(tǐ)外(wài)診斷試劑說(shuō€↕¶€)明(míng)書(shū)信息性內(nèi)容的(de)✔& ©文(wén)字性變化(huà)可(kě)由注冊人(rén)自(z©♠εì)行(xíng)修改，其中包括體(tǐ)外(wài)✘'診斷試劑說(shuō)明(míng)書(shū)“标‌✔☆識的(de)解釋”項目，因注冊人(rén)按照(zhào)YY/T✔→γ0466系列标準完善體(tǐ)外(wài)診斷試劑說(shuō​∏)明(míng)書(shū)中相(xiàng)應标識的(de)解釋內(n™↔èi)容，導緻該項內(nèi)容變化(huà)，但(₽→ dàn)不(bù)涉及其他(tā)需辦理(lǐ)許可(k¶λ∞≥ě)事(shì)項變更的(de)情況，注冊人(r鮶n)應自(zì)行(xíng)修改。此處YY/T0466系•>σ 列标準可(kě)為(wèi)YY/T0466系列标準或其對(du<​ì)應的(de)ISO 15223标準。如(rú)♣¥π注冊人(rén)自(zì)行(xíng)修改，應在↑αε延續注冊時(shí)予以說(shuō)明(mínβ₽Ωg)。