【轉載】不(bù)合格标本對(duì)檢驗結果影(yǐng)響究竟有(★•yǒu)多(duō)大(dà)？

發布時(shí)間(jiān)：2021-06-28

來(lái)源：中國(guó)體(tǐ)外(wài)診斷₽¥≠α網CAVID

臨床檢驗工(gōng)作(zuò)中遇到(dào)♦∑£§的(de)不(bù)合格标本主要(yào)表現(xiàn)÷€↓§在溶血、凝血、污染、采集量不(bù)足或過☆÷λ←多(duō)、标識錯(cuò)誤等。

不(bù)合格标本産生(shēng)的(de)原因主要•ε(yào)包括：

(1) 使用(yòng)了(le)錯(cuò)誤的(de)容器(qì)或添加σ↕劑；

(2) 使用(yòng)了(le)不(bù)恰當的(de)采®☆σ 血器(qì)具，如(rú)使用(yòng)規格×♦過小(xiǎo)或過大(dà)的(de)針頭容器(εqì)，使用(yòng)過大(dà)的(✘←φ♠de)負壓真空(kōng)管等；

(3) 樣本标識錯(cuò)誤；

(4) 标本采集過程中的(de)操作(zuò)不(bù★φ)規範使标本發生(shēng)溶血；

(5) 采血量過少(shǎo)或過多(duō)；

(6) 标本污染。不(bù)合格标本肯定會(huì)×♥影(yǐng)響檢驗結果。

01

血細胞計(jì)數(shù)和(hé)分(f"©♦ēn)類計(jì)數(shù)

采血不(bù)順暢、抗凝劑比例不(bù)當或混勻不§¥♦(bù)徹底使得(de)抗凝不(bù)充分(fēn)導緻的(deγ <₽)血液凝固或血細胞聚集，導緻相(xiàng)應細胞計(jì)數(shù→₽)結果的(de)偏低(dī)；聚集的(de)細胞還(hái)可(kě)₩₽★ 能(néng)被儀器(qì)誤判為(wèi)其他(tā)細胞≤§數(shù)量的(de)不(bù)準确。

末梢血采集過程中過分(fēn)擠壓造成組織液混入，導緻血小(xiǎλ←™↔o)闆的(de)聚集，導緻血小(xiǎo>•Ω≥)闆計(jì)數(shù)值偏低(dī)，同時(shí)組織液的(de)混© 入還(hái)可(kě)引起血液的(de>≠≈♠)稀釋。

抽血、混勻手法過于劇(jù)烈或添加物(w$Ω↓★ù)不(bù)當造成的(de)溶血，可(kě)導緻細胞計(jì)數(s≥¶λhù)結果偏低(dī)。在末梢血采集時(shí)，消毒劑未完全幹燥之前進行(xíng)穿刺可(kěΩ'§✘)能(néng)導緻血細胞的(de)破壞，引起計(jì¶×≈£)數(shù)結果偏低(dī)。

炎症浸潤部位采血導緻局部炎症細胞的(de¥÷↔)混入，導緻細胞形态的(de)不(bù)正常，血細胞的(de)黏←β→σ附、聚集合并導緻細胞分(fēn)類計(jì)數(shù)結果受影(yǐnφ ≈g)響。

血液細胞學檢查應使用(yòng) EDTA 抗凝，錯(cuò)誤的(de)抗凝劑可(kě)能(néng)引起血細胞形态的(de♣ ™)變化(huà)，造成血細胞計(jì)數(shù)和(hé)分(fēn)類的(→∏¥de)不(bù)準确，如(rú)草(cǎo)酸鹽和(hé)肝素抗凝可(kě)引起血≈φΩ小(xiǎo)闆數(shù)、白(bái)細胞數(s≈¶hù)和(hé)淋巴細胞計(jì)數(shù)結果的≤ <(de)偏低(dī)。

02

出凝血項目

采血不(bù)順暢、血量過少(shǎo)引起抗凝劑©₩₹ 比例不(bù)當或混勻不(bù)徹底使得( ≠de)抗凝劑不(bù)充分(fēn)，導緻凝血過程激§ 活和(hé)凝血因子(zǐ)的(de)消耗。這(zhè)種情況可(kě)能(néng‌≈)引起內(nèi)源性、外(wài)源性凝血時(shí)間(jiān)的(de• ✔♠)延長(cháng)以及部分(fēn)凝血因子(zǐ)測定結果的±&®(de)偏低(dī)。

錯(cuò)誤的(de)抗凝劑如(rú) EDTA 、肝素，÷'"尤其是(shì)肝素會(huì)造成 PT 、 APTT ®←ε時(shí)間(jiān)的(de)延長(cháng)。

抽血不(bù)順暢，壓脈帶綁紮時(shí)間(jiān)過長(ch•↔áng)（不(bù)宜超過 30s ）引起血流淤帶或血管受損可(kě)能(néng♣‌)引起組織因子(zǐ)進入血液，造成部分(©→fēn)凝血因子(zǐ)測定結果降低(dī)。

03

紅(hóng)細胞沉降率

标本溶血、采血不(bù)順暢、抗凝劑比例不(bù)當或混勻不(‌®εbù)徹底等使得(de)凝血激活，血漿成分(fēn)改變，紅(hóng)↕•γ細胞形态變化(huà)等标本采集缺陷均可(kě)能(néng)引 ★ 起不(bù)同程度的(de)紅(hóng↓β)細胞聚集，從(cóng)而引起血細胞沉降率的(de)加快(kuài)♥β✔。此時(shí)可(kě)能(néng)引 ≠€♦起組織因子(zǐ)進入血液，造成部分(fēn)凝血因子(♠₹zǐ)測定結果降低(dī)。

04

生(shēng)化(huà)項目

生(shēng)物(wù)化(huà)學£α≈≈主要(yào)測定人(rén)體(tǐ)內(nèi)的(de)離(lí)子(z₹ε₩ǐ)、酶類和(hé)代謝(xiè)物(wù)質。這(zhè)些(xiē)物<♣(wù)質在人(rén)體(tǐ)不(bù)同組織、細胞內‍→♠₽(nèi)濃度差異比較大(dà)，受溶血∞♣影(yǐng)響大(dà)；部分(fēn)物(wù)質‌£如(rú)酶類和(hé)代謝(xiè)産物(wù)穩定性差，易降解★'£>，還(hái)有(yǒu)化(huà)學方法本身(shēn)特異性較差，易'♥≠受标本中異常物(wù)質的(de)幹擾，因此生(shēng)物(wùβ♦Ω)化(huà)學項目的(de)檢測對(duì)标本要(yào)♣≠求較高(gāo)。

（1）溶血：當溶血發生(shēng)時(shí)，紅(• &hóng)細胞內(nèi)容物(wù)進入血漿，引起血漿成分(fēn)δ§‌↕的(de)改變，對(duì)一(yī)些(xiē)細胞內(nèi)外(wài)濃度差較大(dà)的(de)檢測項目（如(rú)谷草(cǎo)轉氨酶、乳酸脫δ♦®™氫酶、鉀）的(de)測定結果造成較大(dà)的(de)影(yǐn™ g)響。

（2）脂血：脂血主要(yào)是(shì)由于血清α£中的(de)乳糜微(wēi)粒增多(duō)引起的(de)，因後者具有(yǒu)散射光(guāng)的(de)特性，對(duì)比色法和(hé)比濁法均可(kě)産生(shēng)嚴重的(de)幹★™>擾，而且這(zhè)種幹擾不(bù)能(néng)通(tōng)φ•過雙波長(cháng)進行(xíng)消除<>。

（3）黃(huáng)疸：膽紅(hóng)素在 400 ～ 540 n♥₹↑m 波長(cháng)處有(yǒu)光(guāng)吸收，标本放(♥¶βfàng)置時(shí)間(jiān)過長(cháng)或通(tōng₹&)過氧化(huà)劑後膽紅(hóng)素還∑ ♥(hái)可(kě)被氧化(huà)為(wèi)膽綠(lǜ)素、膽褐素，這(♠>∞zhè)些(xiē)物(wù)質同樣可(kě)以引♠™✘起光(guāng)吸收的(de)改變，從(cóng¥∏↔)而影(yǐng)響檢驗結果，對(duì)于單波長(chε☆ ☆áng)的(de)儀器(qì)這(zhè)種影(yǐng)響更為(wèi)顯著$÷。

（4）抽血不(bù)順暢、壓脈帶使用(yòng)可(kě)導緻靜(jìng)脈血血流的(de)瘀滞，造成血乳酸濃度的(de)升高(gāo)。

（5）血氣分(fēn)析樣品在樣本采集過程中若未排空(kōng)氣或未與空(kōng)氣完全隔離(lí)，則可(kě)能(néng)引起氧分(fēn)壓測定結果升高(gāo)，二氧化(huà)碳分(fēn)壓測<¥'₹定結果降低(dī)。

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免疫檢測項目

免疫學項目是(shì)通(tōng)過标記或不(bδγλù)标記的(de)抗原抗體(tǐ)反應對(duì)被×→≠$測物(wù)（抗原或抗體(tǐ)）進行(xíng)測定，由于抗原抗體↓→β'(tǐ)反應具有(yǒu)很(hěn)好(hǎo)的φ♠‍(de)特異性，因此測定結果受影(yǐng)響相(xiàng♣β)對(duì)較少(shǎo)。

然而由于免疫學檢查項目被測物(wù)含量一(yī)₹←♠'般較低(dī)，若樣本存在缺陷，尤其是(shì)交叉污染，一(yī∑γ¶≈)旦發生(shēng)，對(duì)結果産生(sh♦≠↓ēng)的(de)影(yǐng)響可(kě)能(néng)較大(dà)。

免疫學測定常用(yòng)的(de)方法包括免↑♦"疫濁度法、酶标記顯色的(de)方法，如(rú) ELISA 和(h★&☆é)免疫印迹、熒光(guāng)标記的(de)方法、膠體(tǐ'≈∏£)金(jīn)标記的(de)斑點滲濾或層析方法，不(bù)同的(de)αλ檢測方法對(duì)标本缺陷的(de)敏感性不(bù)同。

1、免疫濁度法：使用(yòng)光(guāng)學方法直接對(duì)抗原抗體§¥¶§(tǐ)反應産生(shēng)的(de)沉澱進行(xíng)‌ 檢測，因此對(duì)标本的(de)顔色、透明(míng)度比較敏感φ↑，嚴重的(de)溶血、脂血和(hé)黃(huáng)疸可(€♠÷¶kě)能(néng)對(duì)此類實驗産生(shēng)幹擾，造<♣©♦成結果偏高(gāo)。

2、酶标記顯色技(jì)術(shù)：通(tōng)常¶λ使用(yòng)辣根過氧化(huà)物(wù)酶等進行(xíng)标記并催 ↓≠↑化(huà)底物(wù)顯色，标本中如(rú)有(yǒu)強還(hái)原劑污染（如(rúαβ↕φ)維生(shēng)素 C 輸注同側肢體(tǐ)采血）時(Ωδshí)，會(huì)對(duì)結果産生(shēng)影(yǐng)響，産εδ€δ生(shēng)假陰性。另外(wài)由于血紅(hóng)蛋白(bái)具有(yǒu)"¶σ過氧化(huà)物(wù)酶活性，嚴重的(de)溶血标本也(yě)可(k'☆ě)能(néng)催化(huà)底物(wù)顯色，提高(g±•♣ āo)本底或産生(shēng)假陽性。

06

血培養

不(bù)合格血培養标本主要(yào)為(wèi)污染、血•≠Ω液和(hé)培養液比例不(bù)當、不(bù×¥₹<)恰當的(de)血培養瓶。

1、污染：采集不(bù)規範可(kě)以造成污染Ω£ φ可(kě)能(néng)發生(shēng)于血培養操作✔↓(zuò)的(de)任何階段，大(dà)量研究表明(míng)，&£±∑皮膚定植菌群是(shì)血培養污染的(de)常見(jiàn)細菌，說(shuō¥¥π)明(míng)皮膚消毒的(de)不(bù)徹底和≥♣(hé)采血操作(zuò)不(bù)當是(shì)污染的(de)主要(yào<✔)原因。

采血過程中血液易受到(dào)皮膚表面菌群的(de)污染，主要(y✘♠↑≤ào)在外(wài)周靜(jìng)脈穿刺時(shí♦←>)，局部皮膚消毒不(bù)徹底，細菌随針刺帶入被檢血液而$↔ 被培養出來(lái)。

其次，長(cháng)期留置血管導管的(de)患者，其導管₩÷α>長(cháng)期暴露于皮膚外(wài)界，造成這(zhè)些(x♠←$₽iē)菌群的(de)移生(shēng)。血液培養也(¥ ≠yě)常從(cóng)這(zhè)些(xiē)導管處采血，因此經常會(huì)>'γ☆在采血過程中将導管內(nèi)移生(shēng)↓δ‌的(de)細菌帶走而培養出來(lái)。

即使嚴格的(de)無菌操作(zuò)采集血标本也(yě)很(hěn✔α)難将污染率控制(zhì)在 2％以下(xià)。血培€÷☆♦養污染将導緻不(bù)必要(yào)的(de)抗生(shēng)素 α治療，延長(cháng)住院時(shí)間(jiān)，增加患者醫(yī)療•↔費(fèi)用(yòng)和(hé)細菌耐藥性的(de)産生(shēng)。

2、血液和(hé)培養瓶比例不(bù)當：成人(rén)和(hé)兒™¥(ér)童血培養血量的(de)采集标準不(bù)同，應嚴格按照(zhà₩δo)廠(chǎng)家(jiā)推薦的(de)标準進行(xíng)采集©>，采血量過多(duō)或少(shǎo)均會(huì)降低(‍∏dī)血培養的(de)陽性率。

3、選擇不(bù)恰當的(de)血培養瓶：全自(zì)動血培養瓶的(★&ε∞de)種類有(yǒu)普通(tōng)瓶、中和(hé)抗生(shēng)素瓶、ΩΩ厭(yàn)氧瓶、兒(ér)童瓶等，每一 (yī)種培養瓶滿足不(bù)同的(de)臨床需求，選擇不(bù)恰當的(de)血培養瓶将降低(dī)陽性率。

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分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物(wù↓®≈)學檢測項目

分(fēn)子(zǐ)生(shēng)物(wù)學标本的(de)不(bù)合格€σ♠常見(jiàn)于抽血操作(zuò)不(bù)規範引起的(de)外(wài)源核酸污染，₽$∞÷模闆 RNA 降解以及PCR抑制(zhì)物(wù)的(de)存在。

1、外(wài)源核酸污染：由于 PCR ₽∑₹≈的(de)靈敏度非常高(gāo)，理(lǐ)論上(shβδ★àng)一(yī)個(gè)核酸分(fēn)子(zǐ)的(de)污染都(d≈σōu)有(yǒu)可(kě)能(néng)引♠¥ σ起結果的(de)假陽性，因此 PCR 标本采集最好(hǎo)使用(yòng)無菌、γ<✘無核酶的(de)一(yī)次性器(qì)材→α↕β，取材必須嚴格執行(xíng)無菌操作(zuò✘ε♥‍)，并小(xiǎo)心防止混入操作(zuò)者或受檢者的(de)≈ 毛發、皮屑等。密封運輸和(hé)保存，不(bù)能(néng)在擴增區✘Ω♥δ(qū)域進行(xíng)标本的(de)采集和(hé)處理(lǐ) ♥，防止 PCR 産物(wù)的(de)污染。♦φ

2、靶基因的(de)降解：一(yī)般情況下(xià)‌∏®，無菌采集的(de) DNA 樣本穩定性較•✔好(hǎo)，在室溫下(xià)放(fàng)置 8h 仍不(bù)影£δ↔γ(yǐng)響檢驗，但(dàn)如(rú)↕↔果操作(zuò)不(bù)當、抽血容器(§>' qì)不(bù)清潔、放(fàng)置時(shí)間(jiān)過長(chá≠÷ng)或有(yǒu)污染， DNA 鏈有(yǒu↔λ™)可(kě)能(néng)發生(shēng)斷裂，使長(cháng)片段的(φ★de)擴增變得(de)困難。靶基因降解對(d δ&"uì)于 RNA 樣品影(yǐng)響更為☆β≠(wèi)嚴重，由于環境中大(dà)量 RNA 酶的(de)存在，若樣品保存、♣> 運輸條件(jiàn)不(bù)佳或存放(fàng)時(shí)₹•間(jiān)過長(cháng)，模闆 RNA 非常容易降解，造成假陰α↔ 性。

3、 PCR 抑制(zhì)物(wù)：反轉錄反應和(hé) Pβ ±≥CR 反應均為(wèi)酶促反應，任何可(kě)能(néng)抑制(zhì)>™♦<這(zhè)些(xiē)反應的(de)物(wù)質都(dōu)會(huì∏&‌∞)影(yǐng)響檢驗的(de)結果。樣本采σ©集缺陷導緻的(de)常見(jiàn)的(de)抑制(zhì)物(w→≤♥ù)包括肝素、血紅(hóng)蛋白(bái)、乳鐵(tiě)蛋白(bái)、 >€σIgG 、蛋白(bái)酶、纖維素等。

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末梢血和(hé)靜(jìng)脈穿刺樣本分(fēn)δ☆ ☆析物(wù)的(de)差異

末梢血的(de)血紅(hóng)蛋白(bái)、葡萄糖、鉀檢測₹&π¶的(de)結果高(gāo)于靜(jìng)脈血，α→ ₹而鈉、氯、鈣、膽紅(hóng)素和(hé)總蛋白(b≈↕ái)的(de)檢測結果低(dī)于靜(jì✘±☆ng)脈血。末梢血氧分(fēn)壓和(hé)氧飽和(hé)度低(dī)于動脈血。運用(yòng)末梢血檢測這(zhè)些(xiē)項目時(shí)應 α↓建立參考範圍，同時(shí)在檢驗報(bà★≈‍‌o)告上(shàng)注明(míng)标本類型。

對(duì)于不(bù)合格的(de)标本，即使實驗室采用(yò♥‌₩♣ng)最好(hǎo)的(de)方法和(hé)技(jì)術(shù≥≈>)，檢測工(gōng)作(zuò)都(dōu)是(shì)無效的(de↑"₽÷)勞動，檢測結果會(huì)贻誤患者的(de)及時(s♦εhí)診斷和(hé)正确治療。

樂(yuè)合資訊

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